產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4210 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Porcine Enterovirus(PEV)RTPCR | BKP4210 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate 中文名:2-萘基N-苯甲?;奖彼狨?/span> 分子式:C26H21NO3 干細(xì)胞因子受體 (SCF R) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 中文名: 分子式:C5H6N2OS 血清淀粉樣蛋白 英文名稱: serum amyloid A protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SAA
2-Methylanthraquinone 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 Salusin-α 英文名稱: Salusin-α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Salusin-α
2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 干細(xì)胞因子 英文名稱: stem cell factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SCF
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 中文名: 分子式:C16H15NO3 干細(xì)胞因子受體 英文名稱: stem cell factor receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SCF R
焦碳酸二乙脂 10ml Amorolfine 中文名:鹽酸阿莫洛芬 分子式:C21H36ClNO 度:98.0%
膠質(zhì)纖維酸性蛋白 英文名稱: glial fibrillary acidic protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GFAP 3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 899822-97-0 中文名: 分子式:C17H25NO3
膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)營養(yǎng)因子 英文名稱: glial cell line-derived neuoophic factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GDNF L-Dihydroorotic acid 中文名:L-4,5-二氫乳清酸 分子式:C5H6N2O4
堿性酯酶染液 Wright'dye 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0%
堿性木聚糖酶測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Testosterone enanthate 315-37-7 中文名:庚酸睪酮 分子式:C26H40O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Diethylene Glycol Diacetate
原代內(nèi)皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml三甘醇二乙酸酯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Triethylene Glycol Diacetate
HT1080細(xì)胞,纖維細(xì)胞 細(xì)胞,HCE1細(xì)胞 人表皮色素細(xì)胞-中色素總RNAHEM-m NAO-乙?;吐樗峒柞?/span>(>80.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>80.0%(GC)Methyl O-Acetylricinoleate
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+檸檬酸三乙酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)Triethyl
FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二去甲基佐米曲坦質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Didesmethyl Zolmitriptan
Bel-7405細(xì)胞,人細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細(xì)胞,PA317細(xì)胞 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21改良番茄汁培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:500毫升
L6(大鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2姆沙伯 G AW ChroMosorb G cW;
Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml聚乙二醇 1000 Poly(ethylene glycol) 1,000 (PEG 1000) 25322-68-3 100G 通用試劑
人表皮色素細(xì)胞-淺色素RNAHEM-l miRNA5 μg靛藍(lán)胭脂紅shēng huà shì jì容量:5克
VASN Others Human 人 VASN / Vasorin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-Galacturonicacid 5g/10g/25g原裝 Fluka 48280
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。