產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4196 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Poliovirus 2 (PV2)2RTPCR | BKP4196 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone 18465-71-9 中文名: 分子式:C5H8O4 Human fibroblast surface aigen (FSP) ELISA Kit 人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒
Tetrahydrolachnophyllum lactone 56407-87-5 中文名: 分子式:C10H14O2 HumanCompleme4,C4ELISAKit 人補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
(Z)-Lachnophyllum lactone 81122-95-4 中文名: 分子式:C10H10O2 HumanDesmopressin/1-desamino-8-D-argininevasopressin,dDAVPELISA試劑盒人去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Araliadiol 1354638-93-9 中文名: 分子式:C15H20O2 組織MEK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Annonacin 111035-65-5 中文名: 分子式:C35H64O7 HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人0酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
骨堿性0酸酶 英文名稱: bone alkaline phosphatase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BALP Otophylloside B 106758-54-7 中文名:青陽參苷B 分子式:C49H78O16 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 抗; 青陽參; 孕甾烷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
骨鈣素 英文名稱: Osteocalcin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: OC Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside 中文名: 分子式:C41H58O14
骨成型蛋白-4 英文名稱: Bone morphogenetic protein-4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BMP-4 Anthraquinone-2-carboxylic acid 中文名:蒽醌-2-羧酸 分子式:C15H8O4
骨成型蛋白-2 英文名稱: Bone morphogenetic protein-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BMP-2 Anthraquinone-2-carboxylic acid 中文名:蒽醌-2-羧酸 分子式:C15H8O4 度:98.0%
谷酰胺測(cè)試盒 Glamine test kit 3-Methylamino-1-(2-thienyl)-1-propanol 116539-55-0 中文名: 分子式:C8H13NOS
病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格VDR Others Mouse 小鼠 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大孔柱層析硅膠(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格:300-400目,層析用
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓硅酸(>98%,BC)Silicic acid hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]細(xì)胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮細(xì)胞)一氧化硅(>99%,BR)Silicon monoxide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人T瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77鎢硅酸(>98%,BR)Silicotungstic acid hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 乙酸銀(>99%,BR)Silver acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 Rattus鹽酸脫氧土霉素,英文名或英文縮寫:Doxycycline HCl,級(jí)別:15000~150000,液體,7條帶,規(guī)格:100毫克
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)3,3,5-三基環(huán)(順反混合物) 3,3,5-Trimqthylcyclohqxcnol 116-0-9
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) ACRYLAMIDE酰胺蛋白組學(xué)級(jí)白色結(jié)晶RTsigma
CL-0173NRK(大鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2阿糖腺嘌吟,英文名或英文縮寫:Ara-A,級(jí)別:超,98%,規(guī)格:1克
HepG2細(xì)胞, 人T瘤細(xì)胞系,Hut-102細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3673-06-3D-本;D-2-基-3-本基;D-α-基-β-本;D-α-基氫化肉桂酸D-pxenylalanine;D-α-AMino-β-pxenylpropionic acid;(R)-(+)-pxenylalanine;(R)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;D-β-pxenylalanine
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。