產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4189 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Plasmodium vivaxPCR | BKP4189 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone 中文名:2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮 分子式:C23H30N2O2 血紅蛋白檢測(cè) (Mg) test case (machine, manual)
2-Benzoylbenzoic acid 中文名:2-苯甲酰苯甲酸 分子式:C14H10O3 產(chǎn)品名稱 Serum low-density lipoprotein (LDL) test kit
2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate 中文名:二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯 分子式:C12H14N2S3 甘油三酯(TG酶法)測(cè)試盒 Serum high-density lipoprotein (HDL) test kit
2-Benzothiazolol 中文名:2-羥基苯并噻唑 分子式:C7H5NOS 總膽固醇(CHO酶法)測(cè)試盒 Glucose (Glu) test case
2-Aminothiazol-4-acetic acid 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S 生長(zhǎng)素 英文名稱: Angiogenin 英文縮寫: ANG 規(guī)格: 48T/96T
肝生素/肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子 英文名稱: hepatocyte growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HGF Przewaquinone A 76843-23-7 中文名:紫丹參甲素 分子式:C19H18O4
肝/肌糖元檢測(cè) Lipofuscin (including colorimeic detection) Racecadotril 81110-73-8 中文名:消旋卡多曲 分子式:C21H23NO4S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
肝/肌糖元測(cè)試盒 Liver / muscle glycogen test kit 4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine 145783-15-9 中文名: 分子式:C7H9Cl2N3S
甘油三酯(TG酶法)測(cè)試盒 Serum high-density lipoprotein (HDL) test kit Oxytetracycline 2058-46-0 中文名:鹽酸土霉素 分子式:C22H25ClN2O9 度:98.0%
甘油三酯(TG)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Atorvastatin calcium 中文名:阿托伐他汀鈣 分子式:C33H35FN2O5 度:98.0%
PCR檢測(cè)試劑盒直銷WI-38(人胚肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸心得安質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Propranolol hydrochloride
HUASMC-c 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HUASMC) 500,000cells 胃黏膜上皮Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)(R)-(+)-鹽酸心得安質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(R)-(+)-Propranolol hydrochloride
子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)外消旋心得安β-D-葡萄糖苷酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口rac Propranolol β-D-Glucuronide Salt
IL3 Others Human 人 IL-3 / Ierleukin-3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 外消旋7-羥基心得安質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口rac 7-Hydroxy Propranolol
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1纈絡(luò)肽(VQY),豬質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRValosin Peptide (VQY),porcine
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17wo7iumFORMATE酸鈉*白色粉末RTsigma
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 燦爛綠;亮綠;減性亮綠;鹽沙綠 Brillicnt grqqn;DicMond grqqn G;qMqrcld grqqn crystcl;Mclcchitq grqqn G;C.I. 42040 633-03-4
CL-0306SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2二青 FF Xylene Cyanol FF (for molecular biolog... 2650-17-1 1G 染色劑
A673細(xì)胞,橫紋肌癌細(xì)胞 人巨核細(xì)胞保細(xì)胞,Dami細(xì)胞 人惡性多發(fā)性;ERA-2D--TagatoseD-塔格糖250毫克BR,牡蠣提取
293T(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-Mine 25g/100g/250g/Sigma5g 國(guó)產(chǎn)