產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4173 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
奧爾森派琴蟲PCR檢測試劑盒直銷 | Perkinsus olseniPCR | BKP4173 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2-Amino-4'-fluorobenzophenone 3800/6/4 中文名: 分子式:C13H10FNO HumanPodocalyxin,PCXELISAKit人足細胞標記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Enalapril maleate 76095-16-4 中文名:馬來酸依那普利 分子式:C24H32N2O9 兔子組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Pioglitazone 112529-15-4 中文名:鹽酸吡格列酮 分子式:C19H21ClN2O3S Rat vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
Amlodipine besylate 111470-99-6 中文名:苯磺酸氨氯地平 分子式:C26H31ClN2O8S humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Sulfamethoxazole 723-46-6 中文名:磺胺甲噁唑 分子式:C10H11N3O3S HumanCysticercosisaybody,CYTAbELISA試劑盒人囊蟲病抗體(CYTAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tofacitinib 540737-29-9 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISAKit ELISA. 96T/48T Toltrazuril 中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S
大鼠雌激素受體(ER)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tiotropium bromide 136310-93-5 中文名:噻托溴銨 分子式:C19H22NO4S2
大鼠補體片斷*(C*)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tokinolide B 112966-16-2 中文名: 分子式:C24H28O4
大鼠補體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tofacitinib 540737-29-9 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8 度:98.0%
奧爾森派琴蟲PCR檢測試劑盒直銷大耳山羊肺細胞;LDG-12-甲基環(huán)戊[I]菲(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene
SFRP1 Others Mouse 小鼠 sFRP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Naphtho[2,3-a]pyrene
CL-0055Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細胞)5×106cells/瓶×22-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2-Chlorophenothiazine
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine
小鼠腸上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL異丁司特質(zhì)量規(guī)格:>98%Ibudilast
A2(人腺樣囊性癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠色素瘤細胞;B1696孔不可拆酶標板1毫克 保存:-20℃
人臍平滑肌細胞RNAHUVSMC miRNA5 μg三溴酚 2,4,6-Tribromophqnol 118-79-6
大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細胞(RAh)(5×105)液體生物防腐劑1克
恒河猴腎細胞;LLC-MK2N-甲基吩嗪甲基鹽25克
KM小鼠網(wǎng)織細胞瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL609-71-22-羥基煙酸2-xy7noxynicotinic acid
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:奧爾森派琴蟲PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。