產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4165 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒直銷 | Penicillium purpurogenumPCR | BKP4165 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone 2958-36-3 中文名:2-氨基-2',5-二氯二苯酮 分子式:C13H9Cl2NO 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Allylphenol 1745-81-9 中文名:2-烯丙基酚 分子式:C9H10O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Acetylfluorene 781-73-7 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Acetylbutyrolactone 517-23-7 中文名:2-乙?;?nèi)酯 分子式:C6H8O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Acetyl-6-methoxynaphthalene 3900-45-6 中文名:6-甲氧基-2-乙酰萘 分子式:C13H12O2 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
超微量Ca2+Mg2+-ATP酶測定試劑盒(比色法) Aurantio-obtusin 中文名:橙黃決明素 分子式:C17H14O7
超微量ATP酶測試盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、T-ATP酶) Withaperuvin C 81644-34-0 中文名: 分子式:C28H38O7 度:96.5% 關(guān)鍵詞: 酸漿屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
超土壤基因組DNA快速提取試劑盒 Rapid exaction kit for genomic DNA in soil Panaxyne 122855-49-6 中文名: 分子式:C14H20O2
腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H29NO3
產(chǎn)品名稱 Serum low-density lipoprotein (LDL) test kit Oxytetracycline 中文名:鹽酸土霉素 分子式:C22H25ClN2O9
產(chǎn)紫青霉PCR檢測試劑盒直銷大鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯唑沙宗質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRChlorzoxazone
Hep3B人細(xì)胞 Hep3B human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS氯唑沙宗(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Chlorzoxazone
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Ierleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽)D-氨基葡萄糖鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRD-Glucosamine hydrochloride
NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A549 [A-549](細(xì)胞)奧卡西平質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BROxcarbazepine
CL-0448SW 1990(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2奧卡西平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Oxcarbazepine
MRC-5-EGFP+puro人胚 MRC-5-EGFP+puro in human embryo lung fibroblasts MEM+10%Hyclone滅活血清+2ug/ml puromycin鹽酸喹那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Quinapril hydrochloride
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)愛普列特(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定Epristeride
人角膜上皮細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 ) 293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系 Human羥苯磺酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Calcium dobesilate
人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside
BMPR1B Others Human 人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam