產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4209 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬腸道杯狀病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Porcine Enteric Calicivirus(PECV)RTPCR | BKP4209 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬腸道杯狀病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 5751-20-2 中文名: 分子式:C5H6N2OS 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠可溶性E-選擇素(mouse sE-Selectin/sCD62E) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-Methylanthraquinone 84-54-8 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 1975-51-5 中文名: 分子式:C8H7NO4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名: 分子式:C16H15NO3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methoxystypandrone 85122-21-0 中文名: 分子式:C14H12O5 度:98.0% 關鍵詞: 虎杖; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿性蛋白酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Tetracaine 中文名:鹽酸丁卡因 分子式:C15H25ClN2O2
堿性成纖維生長因子 英文名稱: basic fibroblast growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: b-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名:四乙基米氏酮 分子式:C21H28N2O
堿性0酸酶(AKP)檢測 Acid phosphatase (ACP) detection Polypodine B 中文名:水龍骨甾酮B 分子式:C27H44O8
甲狀腺球蛋白抗體 英文名稱: Human Thyroglobulin Aibody 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TGAb Pefloxacin mesylate 70458-95-6 中文名:甲磺酸培氟沙星 分子式:C18H24FN3O6S
甲型H5N1 英文名稱: Influenza A H5N1(Avian Flu) HA 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: H5N1 HA Prosapogenin A 19057-67-1 中文名:薯蕷次皂苷A 分子式:C39H62O12 度:% 關鍵詞: 細胞毒活性; 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
豬腸道杯狀病毒PCR檢測試劑盒直銷TNFRSF17 Others Human 人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 人細胞裂解液 (陽性對照) 黃芪多糖(50%)質量規(guī)格:>50%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole
小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albino黃芪多糖(30%)質量規(guī)格:>30%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole
SAE1 Others Human 人 SAE1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3-奎寧環(huán)酮鹽酸鹽質量規(guī)格:>98%3-Quinuclidinone HCl
QGY-7701, 人細胞伊索拉定質量規(guī)格:≥99%,BRIrsogladine
NSC,大鼠神經(jīng)干細胞 人腦視神經(jīng)細胞,Hs 683細胞 RF/6A(猴脈絡膜-視網(wǎng)膜(內皮)細胞)黃柏酮(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Obacunone
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽性對照) Camphore2-莰酮100克CP,96%
C57BL/6小鼠骨髓間質干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells芐基三基錄化銨;三基下基錄化銨 BqnzyltriMqthylcMMoniuM chloridq 26-93-9
HME6細胞,人色素瘤細胞 動物雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B細胞;KMY0919 10B Naphthol Blue Black (for electrophores... 1064-48-8 5G 染色劑
UMR-106(大鼠細胞) 5×106cells/瓶×24-(對硝基本偶氮)-1-奈酚,英文名或英文縮寫:4-(4-nitnopxenylazo)-1-naphthol,級別:高,50%,規(guī)格:5克
Hut-102(人皮膚T瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細胞株 EB病毒轉化的人B細胞;KMY1022MacerozymeR-10 1g/5g/10g/100g原裝 Yakult.JAPAN
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。