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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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病毒通用型PCR檢測(cè)試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP4198
  • 價(jià)格: ¥2499/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP4198
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

病毒通用型PCR檢測(cè)試劑盒說明書

Poliovirus(PV)RTPCR

BKP4198

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:病毒通用型PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline  中文名:  分子式:C31H25FNOP    λ噬菌體基因組DNA快速提取試劑盒   Fast exaction kit for phage genomic DNA

2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  中文名:  分子式:C10H7F3N2O    超土壤基因組DNA快速提取試劑盒   Rapid exaction kit for genomic DNA in soil              

2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone  中文名:  分子式:C5H8O4    血紅素氧化酶 (HO-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

2-C-Methyl-D-erythritol  中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇  分子式:C5H12O4    熱休克蛋白 27(HSP27)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine   中文名:  分子式:C9H10Cl2F3NO    熱休克蛋白 70(HSP70)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝
海藻糖含量測(cè)試盒   可見分光光度法   50/48              Pemetrexed di  357166-30-4  中文名:培美曲塞二鈉  分子式:C21H23N5Na2O6 

還原型谷胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒(微板法)                    3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  中文名:  分子式:C8H8O4 

還原糖含量測(cè)試盒   可見分光光度法   50/24  3-Aminoadamantan-1-ol  中文名:  分子式:C10H17NO  度:98.0%

過氧化物酶體增殖物活化受體γ   英文名稱:   Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   PPARγ  4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  35202-54-1  中文名:  分子式:C11H11NO2 

(OC43/HKU1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Annonacin  中文名:  分子式:C35H64O7
病毒通用型PCR檢測(cè)試劑盒說明書U-2 OS, 人細(xì)胞羥基伊曲康唑-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Hydroxy Itraconazole-d8

人細(xì)胞;HOS 大鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL丁基伊曲康唑質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Butyl Itraconazole

原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml丙基伊曲康唑質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Propyl Itraconazole

EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 異丙基伊曲康唑質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Isopropyl Itraconazole

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21噴托維林質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Carbetapentane
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg2-脫氧胸苷25

大鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(RM)(5×105)-2.5-二羧醋97% 2,5-Thiophqnqdiccrboxylic ccid 48-31-9

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1正嶙酸鐵二水物25

KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL偏硼酸鈉shēng huà shì jì容量:500

細(xì)胞名稱 種屬60-23-1半胱胺;;2-;硫代;2-基乙CysteaMine;Decarboxycysteine;2-AMinoethanethiol;2-AMinoetxylMercaptan;β-MercaptoetxylaMine;ThioethanolaMine;MercaMine; MEA
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。


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