產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4187 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
卵形PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Plasmodium ovalePCR | BKP4187 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:卵形PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate 95-30-7 中文名:二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯 分子式:C12H14N2S3 I 型膠原 N 末端肽 (X) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
p-Anisoin 119-52-8 中文名:對茴香偶姻 分子式:C16H16O4 (NO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Benzoin 119-53-9 中文名:安息香 分子式:C14H12O2 神經(jīng)生長因子 英文名稱: nerve growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NGF
3-Benzalphthalide 575-61-1 中文名:3-亞芐基苯酞 分子式:C15H10O2 神經(jīng)生長因子受體 英文名稱: nerve growth factor receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NGFR
L-Aspartic acid 56-84-8 中文名:L-天門冬氨酸 分子式:C4H7NO4 中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)性載脂蛋白 英文名稱: Neuophil gelatinase-associated lipocalin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NGAL
封閉用正常山羊血清工作液 Ribavirin 36791-04-5 中文名:利巴韋林 分子式:C8H12N4O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
吩嗪甲酯 1g Trenbolone acetate 10161-34-9 中文名: 分子式:C20H24O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
分泌型白細(xì)胞蛋白酶抑制物 (SLPI) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Anthraglycoside B 23313-21-5 中文名:大黃素-8-O-葡萄糖苷 分子式:C21H20O10
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A 英文名稱: Pulmonary surfacta associated protein type A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SP-A 4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone 中文名:4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮 分子式:C16H14O3 度:99.0%
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白 A(SP-A) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Atrazine 1912-24-9 中文名:阿特拉津 分子式:C8H14ClN5
卵形PCR檢測試劑盒供應(yīng)WI-38AV13細(xì)胞,人SV-40轉(zhuǎn)化 大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞,VSMC細(xì)胞 CL-0010786-O(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫普羅寧(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Tiopronin
SP2/0(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2多索茶堿質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDoxofylline
HDBEC-c 人類皮膚血內(nèi)皮細(xì)胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)多索茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Doxofylline
心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Syk PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl
CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate salt
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-二乙基亞硝,英文名或英文縮寫:N-nitnosodietxylamine,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
人肝臟間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽 2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑
TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L(+)樹膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0
VERO細(xì)胞衍生株;SVP偶氮脒類引發(fā)劑V50shēng huà shì jì容量:2~8℃1克
CGM1細(xì)胞,EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1,8-桉樹腦Cineole
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。