產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4186 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
三日PCR檢測試劑盒說明書 | Plasmodium malariaePCR | BKP4186 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2-Aminothiazol-4-acetic acid 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S 度:98.0% 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Ampicillin Trihydrate 中文名:氨芐西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 度:98.0% 小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0% 小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 度:98.0% 小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 中文名:(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 度:99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
二氧化快速測試盒 dioxide rapid test case α-Spinasterol glucoside 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6
二氫二醇脫氫酶 英文名稱: Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DDH2 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 145163-97-9 中文名: 分子式:C29H48O2
二硫赤鮮醇 5g 3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式:C9H9N3O 度:98.0%
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣 4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di 106261-49-8 中文名:甲磺酸伊馬替尼 分子式:C13H20Cl2N2O2
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 25管/24樣 4,9-Dihydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O5 度:98.0%
三日PCR檢測試劑盒說明書WI-38細胞,人二倍體胚肺細胞 人,LTEP-a-2細胞 QBC-939, 人細胞N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)N-Trimethylsilylacetamide
貓腎細胞;CRFK1,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1,1,3,3-Tetramethyldisilazane
NA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase/NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole
CL-0386MPC-11(小鼠漿細胞瘤)5×106cells/瓶×2N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRZ-Gln-OH
EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照) N-CBZ-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCBZ-L-Gly
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)3,3'-二硝基二苯甲酮(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)3,3'-Dinitrobenzophenone
BE(2)-M17(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;PA3172,4'-二氟二苯甲酮(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)2,4'-Difluorobenzophenone
人成纖維細胞HCF4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)4,4'-Difluorobenzophenone
IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4-Dibenzoylbenzene
大鼠腸內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:三日PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。