產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4184 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雞PCR檢測試劑盒價格 | Plasmodium gallinaceumPCR | BKP4184 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:雞PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-Aminophenyl phenyl sulfide 1134-94-7 中文名:2-氨基二苯硫醚 分子式:C12H11NS 度:98.0% 小鼠肌肝elisa試劑盒 小鼠肌肝試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠肌肝試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肌肝試劑盒、小鼠肌肝eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-Aminonicotinic acid 5345-47-1 中文名:2-氨基煙酸 分子式:C6H6N2O2 度:98.0% 小鼠肌鈣蛋白elisa試劑盒 小鼠肌鈣蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠肌鈣蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肌鈣蛋白試劑盒、小鼠肌鈣蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide 302964-24-5 中文名: 分子式:C11H10ClN3OS 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠活化蛋白elisa試劑盒 小鼠活化蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠活化蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠活化蛋白試劑盒、小鼠活化蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-Aminoisonicotinic acid 13362-28-2 中文名:2-氨基異煙酸 分子式:C6H6N2O2 度:98.0% 小鼠肌肝(Cr)ELISA試劑盒 組裝/原裝
2-Aminofluorene 153-78-6 中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
多酚氧化酶(PPO)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Pirfenidone 53179-13-8 中文名:哌非尼酮 分子式:C12H11NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
多巴胺 英文名稱: Human Dopamine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DPN 3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 中文名: 分子式:C28H46O2 度:%
動植物組織葡萄糖含量試劑盒 酶標(biāo)法 50管/48樣 4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 中文名: 分子式:C14H18ClN3O4 度:98.0%
動植物組織葡萄糖含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 中文名: 分子式:C14H18ClN3O4
動物組織基因組提取試劑盒 Animal tissue genomic Exaction Kit Periplocoside F 119902-17-9 中文名: 分子式:C63H104O23 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
雞PCR檢測試劑盒價格WM451, 人色素瘤細(xì)胞 導(dǎo)管瘤細(xì)胞,BT474細(xì)胞 VERO(非洲綠猴腎細(xì)胞)乳酸測試盒(測全血)shēng huà shì jì容量:RT50支/包
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6十六烷基基化銨 Hexadecyltrimethylammonium chloride,≥... 112-02-7 1G 通用試劑
LRPAP1 Others Human 人 LRPAP1 / A2MRAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 半乳糖二醋異美汀 IsoMqthqptqnq Mucctq 749-31-1
615小鼠樹突狀細(xì)胞瘤株;DCS氘代二甲亞砜shēng huà shì jì容量:500克
CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 121-54-0海胺1622HyaMine 1622;Quatrachlor;PheMerol chloride;PheMeride;PheMithyn;BenzethoniuM chloride Monohydrate;Benzyldimetxyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tetrametxylbutylpxenoxy)ethoxy]etxyl}aMMoniuM chloride;Diisobutylphe-noxyethoxyetxyldimetxylbenzylaMMoniuM chloride Monohydr
NA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-SerineD-蠶絲基酸10克BR,99%
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP3-流基炳全 3-(Mqthylthio)propioncldqhydq 368-49-3
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIB2細(xì)胞 VMR106細(xì)胞,大鼠細(xì)胞DL-ArginineDL-蛋白基酸5克BR,98%
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BSSDS-PAGE蛋白質(zhì)低分子量標(biāo)準(zhǔn)5克2~8℃
CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) b-Glycerophosphatediwo7ium 10g/25g/100g/500g原裝 Sigma G6251
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。