產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4178 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
小雙節(jié)病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Picobirnavirus(PBV)RNARTPCR | BKP4178 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:小雙節(jié)病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-Amino-5-nitrobenzophenone 中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮 分子式:C13H10N2O3 度:98.0% 小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-Aminoindazole 中文名:6-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0% 小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISAKit ELISA. 96T/48T
(R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 中文名:(R)-(+)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO 度:98.0% 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine 中文名:N4-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷 分子式:C16H17N3O5 度:98.0% 小鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine 中文名:N6-苯甲?;?/span>-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷 分子式:C38H35N5O6 度:98.0% 小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠血小板生成素(TPO)ELISAKit ELISA. 96T/48T Periplocoside M 116782-73-1 中文名:北五加皮苷M 分子式:C34H52O9
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子elisa試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1elisa試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 1220-83-3 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S 度:98.0%
大鼠纖溶酶原激活物抑制物elisa試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 1220-83-3 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S
大鼠維生素C(VC)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tolvaptan 150683-30-0 中文名:托伐普坦 分子式:C26H25ClN2O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小雙節(jié)病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;Lec1 高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,HO-8910PM細(xì)胞 SCF細(xì)胞,白鰱尾鰭細(xì)胞卡洛芬乙酯 (卡洛芬雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Carprofen Ethyl Ester (Carprofen Impurity)
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2外消旋卡洛芬-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口rac Carprofen-d3
HA Others H5N1 甲型 H5N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 長(zhǎng)春質(zhì)堿-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Catharanthine-d3
原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml阿苯達(dá)唑砜質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Albendazole Sulfone
RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 培哚普利?;?/span>-α-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Perindopril Acyl-α-D-glucuronide
VWC2 Others Human 人 VWC2 / Brorin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2′-脫氧腺苷250克
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪季務(wù)四醇鱗醋酯 2,6,7-Trioxc-1-phosphcbicyclo2.2.2octcnq-4-mqthcnol, 1-oxidq 2301-78-0
AKT1 Others Human 人 AKT1 / PKB / PKBα 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二硫代蘇糖醇100克
人角膜細(xì)胞RNAHK miRNA5 μg四化1克
7721細(xì)胞,7721細(xì)胞 人細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移),NCI-H292細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪98103-87-82-本基-1-;β-本;2-本;β-羥基異本;β-甲基本基乙醇2-pxenyl-1-propanol;2-pxenylpropyl alcohol;β-xy7noxyisopropylbenzene;β-metxylpxenetxyl alcohol;β-xy7noxycuMene;xy7notropic alcohol
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。