產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4171 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
消化鏈球菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Peptostreptococcus spp.PCR | BKP4171 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:消化鏈球菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 中文名:2-氨基-3-羥基蒽醌 分子式:C14H9NO3 sVE-Cadherin 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
2-Amino-3-Formylchromone 中文名:2-氨基-3-甲?;?/span> 分子式:C10H7NO3 小鼠 ACTH(mouse ACTH) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Phoenix
2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone 中文名:2-氨基-3-氯-1,4-萘醌 分子式:C10H6ClNO2 mouse Activin A 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 原裝進口
2-Amino-3,5-dibromobenzaldehyde 中文名: 分子式:C7H5Br2NO 內(nèi)皮生長因子A 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-A
2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide 中文名:2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚 分子式:C12H10N2O2S 內(nèi)皮生長因子C 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor C 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-C
大鼠Active Caspase-7 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate 136304-78-4 中文名: 分子式:C22H19N3O2
大鼠Active Caspase-3 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate 136304-78-4 中文名: 分子式:C22H19N3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tolvaptan 中文名:托伐普坦 分子式:C26H25ClN2O3
大鼠 C 反應(yīng)蛋白 (rat CRP) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 ADI Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 109837-85-6 中文名: 分子式:C19H34O3
大量DNA產(chǎn)物化試劑盒 A lot of DNA product purification kit Axitinib 中文名:阿西替尼 分子式:C22H18N4OS 度:98.0%
消化鏈球菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)大鼠表皮色素細胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚酸膽酯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)Cholesterol Palmitate
LLC-MK2恒河猴腎細胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS正辛酸膽酯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)Cholesterol n-Octanoate
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)油酸膽酯(>85.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(GC)Cholesterol Oleate
MDA-MB-175VII(人導(dǎo)管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細胞)氯化膽(來自牛脂)(>87.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>87.0%(GC)Cholesteryl Chloride from Beef Fat
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細胞系緊張素 片段1-7醋酸鹽水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口Angiotensin Fragment 1-7 acetate salt hydrate
GRN Protein Human 重組人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽)甜蜜素shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
人肝細胞;HL-7702[L-02] 人外周血白細胞完全培養(yǎng)基 100mL5′-核苷酸酶 5′-Nucleotidase human 9027-73-0 500U 通用試劑
人胚腎上皮細胞系;KiMA蒙脫土 K-CcTcLYST 1318-93-0
BPIFB1 Others Human 人 BPIFB1 / LPLUNC1 人細胞裂解液 (陽性對照) Cadmium鎘250毫克BR,97%
CL-0351Hep B1.2(人細胞)5×106cells/瓶×256613-80-0D-本甘醇D-Plenylglycinol