產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4149 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腦膜蠕蟲PCR檢測試劑盒直銷 | Parelaphostrongylus teniusPCR | BKP4149 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:腦膜蠕蟲PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine 中文名: 分子式:C5H4N2O4 度:98.0% 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-Amino-1,3-dimethyluracil 中文名: 分子式:C6H9N3O2 度:98.0% 兔子氧化elisa試劑盒 兔子氧化試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子氧化試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子氧化試劑盒、兔子氧化eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Metoclopramide 中文名:甲氧氯普胺 分子式:C14H22ClN3O2 度:98.0% 兔子血小板因子4elisa試劑盒 兔子血小板因子4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子血小板因子4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板因子4試劑盒、兔子血小板因子4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Amiodarone 中文名:鹽酸胺酮 分子式:C25H30ClI2NO3 度:98.0% 兔子血小板衍生生長因子elisa試劑盒 兔子血小板衍生生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子血小板衍生生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板衍生生長因子試劑盒、兔子血小板衍生生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Zidovudine 中文名:齊多夫定 分子式:C10H13N5O4 度:98.0% 兔子血小板活化因子elisa試劑盒 兔子血小板活化因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子血小板活化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板活化因子試劑盒、兔子血小板活化因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 2-Amino-5-chlorobenzophenone 中文名:2-氨基-5-氯二苯甲酮 分子式:C13H10ClNO
Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒 1-Indanamine 中文名: 分子式:C9H12ClN
Rat angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 大鼠生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒 1-Methyl-3-nitrophthalate 21606-04-2 中文名: 分子式:C9H7NO6
Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 1-Methyl-5-amino-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C14H19N3O2
Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 1-Methyl-aminomethyl naphthalene 14489-75-9 中文名: 分子式:C12H13N
腦膜蠕蟲PCR檢測試劑盒直銷動物上皮細(xì)胞生長添加物-aEpiCGS-2-a鹽酸頭孢他美酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價測定Cefetamet pivoxil hydrochloride
荷蘭白花奶牛牛肺細(xì)胞;DCL1 ,SPA-A1細(xì)胞 SCaBER(膀胱鱗癌細(xì)胞)L-生物喋呤質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Biopterin
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM0501渥曼青霉素質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國進(jìn)口,PI3K/AKT通路的抑制劑Wortmannin
FZD5 Others Human 人 Frizzled-5 / FZD5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴化新斯的明質(zhì)量規(guī)格:>98%Neostigmine bromide
Ca Ski, 人細(xì)胞鹽酸頭孢卡品酯質(zhì)量規(guī)格:JP;722~764μg/mgCefcapene pivoxil HCl
T24, 人細(xì)胞 胚癌細(xì)胞,Pcc4細(xì)胞 NCI-H1299(人細(xì)胞)十一醛shēng huà shì jì容量:25克
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP2,6-二錄醌-4-錄亞安 2,6-Dichloroinoneonq-4-chloroimidq 101-38-
FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 / CD333 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四甘醇,英文名或英文縮寫:TEG,級別:AR,98.5%,規(guī)格:5克
人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2葡萄球菌選擇性瓊脂shēng huà shì jì容量:1克
人腸平滑肌細(xì)胞(HISMC)( 5×105 )7752-82-12-基-5-溴嘧啶2-Amino-5-bromopyrimidine
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。