產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4144 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
副病毒通用PCR檢測試劑盒價格 | Parainfluenza Virus(PIV)RTPCR | BKP4144 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
2,2-Diphenylglycine 3060-50-2 中文名: 分子式:C14H13NO2 人重去甲上腺素(NE-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Phenytoin 57-41-0 中文名:苯妥英 分子式:C15H12N2O2 人生長因子(TAF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Androstadienedione 897-06-3 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2 人相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Nandrolone 434-22-0 中文名:諾龍 分子式:C18H26O2 人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Guaiacol glycidyl ether 2210-74-4 中文名: 分子式:C10H12O3 人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISAKit ELISA. 96T/48T
rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 2-Amino-3-methylbenzoic acid 中文名:2-氨基-3-甲基苯甲酸 分子式:C8H9NO2 度:98.0%
RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-Amino-6-chloropurine 中文名:2-氨基-6-氯嘌呤 分子式:C5H4ClN5
RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-Amino-6-chlorobenzothiazole 95-24-9 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S
RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione 1971-49-9 中文名:2-乙酰基-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮 分子式:C10H7NO3 度:93.0% 關(guān)鍵詞:
Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名:2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2
副病毒通用PCR檢測試劑盒價格非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2N-(1,3,4-Thiadiazolyl)煙酰胺質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口N-(1,3,4-Thiadiazolyl)nicotinamide
FN1 Others Human 人 Fibronectin / Fibronectin Fragme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-煙酰胺單核苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口β-Nicotinamide mononucleotide
615小鼠T細(xì)胞性瘤株;L7712環(huán)丙孕酮質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Cyproterone
MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 (207 Ser/Asp, 211 Thr/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 15β-羥基醋酸環(huán)丙孕酮質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口15β-Hydroxy Cyproterone Acetate
CM-M017小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL咽側(cè)體抑制素Ⅳ質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAllatostatin IV
人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293D-谷酰胺10克RT
ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑
HCC827 人非小細(xì)胞細(xì)胞拂化 litxium fluoridq 7789/4/4
2V6.11人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS輔酶A10克RT
TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白PH緩沖液 PH5.0(20℃)NA
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:副病毒通用PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。