產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4142 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
副病毒4型PCR檢測試劑盒說明書 | Parainfluenza Virus 4a (PIV4a)4aRTPCR | BKP4142 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:副病毒4型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 10097-02-6 中文名:2,2-二羥甲基丁酸 分子式:C6H12O4 FTFungalDNAKit 100T
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 34052-90-9 中文名:1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯 分子式:C12H12N2O2 十六烷基基溴化胺 50g
4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 CTAB 250g
2,2'-Dithiobisbenzanilide 135-57-9 中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式:C26H20N2O2S2 5’-三0酸胞苷三鹽 50mg
Dimethylolurea 140-95-4 中文名:雙羥甲脲 分子式:C3H8N2O3 CTP 100mg
RabbitE-SelectinELISAKit兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-Acetylfluorene 781-73-7 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O
rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone 2011-66-7 中文名:2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮 分子式:C13H9ClN2O3
rabbitEsadiol,E2ELISAKit 兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 2-Acetamidothiazole 中文名:2-乙酰氨基噻唑 分子式:C5H6N2OS 度:99.0%
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-Acetyl-3-ethylpyrazine 32974-92-8 中文名:2-乙酰基-3-乙基吡嗪 分子式:C8H10N2O
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0%
副病毒4型PCR檢測試劑盒說明書非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A腐草霉素質(zhì)量規(guī)格:≥97%,進分Phleomycin
ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人細胞裂解液 (陽性對照) 寡霉素質(zhì)量規(guī)格:>92%,進分Oligomycin, from Streptomyces
小鼠紋狀體神經(jīng)元MN-s紡錘菌素質(zhì)量規(guī)格:≥98%,進分Netropsin dihydrochloride
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢菌素C鋅鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Cephalosporin C zinc salt
人胚;MRC-5精胺氮氧化加合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口Spermine NONOate
人肺鱗癌細胞;NCI-H520二本基脲,英文名或英文縮寫:Dipxenylcartazide,級別:高,規(guī)格:100毫克
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-環(huán)已安基-2-羌基炳磺醋 (CAPSO) 3-(Cyclohqxylcmino)-2-xy7noxy-1-propcnqsulfonic ccid 73463-39-2
狗骨髓間質(zhì)干細胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cellsIODOACETAMIDE代乙酰胺蛋白組學級米白色至黃色結(jié)晶粉末RTsigma
U87MG細胞,人惡性膠質(zhì)母細胞瘤細胞 雜色曲霉 人氣管上皮細胞RNAHTEpiC miRNA5 μgTEBUFFERPH8.0TE緩沖液生物技術級100MLRT
SF17(人細胞) 5×106cells/瓶×21277-49-21-二茂鐵基乙醇1-(Ferrocenyl)ethanol