產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4132 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
綿羊病毒通用PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Ovine Herpesvirus(OHV)PCR | BKP4132 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid 中文名:氨噻肟酸 分子式:C6H7N3O3S 促上腺皮質(zhì)激素 英文名稱: Adrenocor Ticoopic Hormore 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACTH
2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol 中文名: 分子式:C8H16O4 乙酰膽堿 英文名稱: Acetylcholine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACH
1-Testosterone 中文名:1-睪酮 分子式:C19H28O2 雄激素 英文名稱: Androgen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ADG
1-O-Methylnataloe-emodin 中文名: 分子式:C16H12O5 脂聯(lián)素 英文名稱: Adiponectin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: APN/ADP
1-Naphthol 中文名: 分子式:C10H8O 脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 英文名稱: Adipocyte Fatty Acid Binding Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: a FABP
mouse Activin A 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 原裝進(jìn)口 Otophylloside F 250217-73-3 中文名:青陽參苷F 分子式:C48H76O16
MiniELGelExactionKit 100T Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate 1449-61-2 中文名:7-酮基去氫表雄酮醋酸酯 分子式:C21H28O4
MiniEleDNAKit 100T Androst-2-en-17-one 中文名:5α-雄甾-2-烯-17-酮 分子式:C19H28O
M13噬菌體單鏈基因組DNA快速提取試劑盒 Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA Panaxyne 中文名: 分子式:C14H20O2
L-異亮酸 10g Vildagliptin 274901-16-5 中文名:維達(dá)列汀 分子式:C17H25N3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
綿羊病毒通用PCR檢測試劑盒價(jià)格黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2亮抑蛋白酶肽(進(jìn)口)質(zhì)量規(guī)格:≥95%,進(jìn)口半硫酸鹽Leupeptin
KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑質(zhì)量規(guī)格:≥90%,進(jìn)分Pepstatin A microbial
CM-H052人胎盤絨毛膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL膽紅素質(zhì)量規(guī)格:≥85%,BRBilibubin
IL9R Others Rat 大鼠 IL9R / Ierleukin 9 receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 比伐盧定(TFA)質(zhì)量規(guī)格:度大于98%Bivalirudin TFA
小鼠脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL比馬素/貝美前列素質(zhì)量規(guī)格:度> 99%Bimatoprost
Promocell C-28051 Monocyte Attachme Medium, 單核細(xì)胞附著培養(yǎng)基(即用型) 250ml薄荷醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Menthol
人上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B補(bǔ)骨脂定(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Psoralidin
DCBLD2 Others Human 人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 補(bǔ)骨脂二氫黃酮;補(bǔ)骨脂甲素質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Bavachin
CL-0368INS-1(大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2補(bǔ)骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Bakuchiol
EL4IL-2細(xì)胞,瘤細(xì)胞 人急性早幼粒細(xì)胞,NB4細(xì)胞 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)D-(-)-奎寧酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品D-(?)-Quinic acid
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:綿羊病毒通用PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。