產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4131 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
綿羊病毒2型PCR檢測試劑盒供應 | Ovine Herpesvirus 2(OHV2)2PCR | BKP4131 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:綿羊病毒2型PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol 129141-48-6 中文名: 分子式:C8H16O4 度:98.0% 關鍵詞: 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-Testosterone 1965/6/5 中文名:1-睪酮 分子式:C19H28O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1-O-Methylnataloe-emodin 103392-51-4 中文名: 分子式:C16H12O5 度:98.0% 關鍵詞: 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠固 英文名稱: Aldosterone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ALD
1-Naphthol 90-15-3 中文名: 分子式:C10H8O 度:96.0% 小鼠白蛋白 英文名稱: Albumin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ALB
1-Monopalmitin 542-44-9 中文名:1-棕櫚酸單甘油酯 分子式:C19H38O4 度:98.0% 關鍵詞: 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠乙酰輔酶A羧化酶 英文名稱: Mouse Acetyl Coenzyme A Carboxylase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ACC
L-Isoleucine 50g Vildagliptin 274901-16-5 中文名:維達列汀 分子式:C17H25N3O2
Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5 Vildagliptin 中文名:維達列汀 分子式:C17H25N3O2
Lectin,fromiticumvulgaris Trenbolone heptanoate N 中文名: 分子式:C25H34O3
Lectin,fromArachisHypogaea(pean) Trenbolone heptanoate 中文名: 分子式:C25H34O3
Kisser封片液 10ml Anthraquinone 中文名:蒽醌 分子式:C14H8O2 度:98.0%
綿羊病毒2型PCR檢測試劑盒供應家貓肺細胞;FCA-L1 羊膜細胞,Ha Fe細胞 BaF3細胞,小鼠原B細胞株香蜂草苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Isosakuranetin 7-O-rutinoside
人正常上皮細胞;MCF 10A鹽酸萘替芬(標準品)質量規(guī)格:含量測定Naftifine Hydrochloride
PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 碳酸鈣(標準品)質量規(guī)格:含量測定Calcium carbonate
原代神經元細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml甲磺酸氨氯地平(標準品)質量規(guī)格:含量測定Amlodipine mesylate
CD40LG Others Human 人 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲克蘆?。藴势罚┵|量規(guī)格:HPLC法含量測定Troxerutin
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 對錄本酸,英文名或英文縮寫:PCBA,級別:BR,99%,規(guī)格:50毫克
人結直腸腺癌細胞;COLO 320DM [COLO320DM](-)-二異蒎基錄硼完 (-)-Diisopinoccmphqyl chloroborcnq 82116-37-6
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細胞裂解液 (陽性對照) L-(+)-本甘安醋 L-Phqnylglycinq 932-32-2
人肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLxlonofonm:ISOAMYLALCOHOL24:1錄仿:異 24:1生物技術級950MLRT
P815細胞,小鼠肥大細胞癌細胞 V79-4(中國倉鼠肺細胞) 非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-CN-芴甲氧羰?;?/span>-D-色酸NA
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。