產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4115 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 鼻鳥桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)
【英文名稱】: Ornithobacterium rhinotracheale PCR
【貨號(hào)】: BKP4115
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
鼻鳥桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
GDNF Others Human 人 GDNF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) SEQUENCINGGELLOADINGDYE,3X3X核酸電泳上樣緩沖液,測(cè)序用超級(jí)暗紫色微粘稠液體COLDsigma
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL溴化鎘 CcdMiuM broMidq 7789/4/6
MKN-45人細(xì)胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBSD-(+)-基葡萄糖鹽... D-(+)-Glucosamine hydrochloride (≥99%) 66-84-2 25G 通用試劑
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽)N-芐氧羰基-D-本,英文名或英文縮寫:Z-D-pxenylalaninol,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:10克
NCI-H157(人非小細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞)(L-抗壞血酸,維生素C)
A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/mL,基體:水)Saccharin salt solution質(zhì)量規(guī)格:1.00mg/mL,基體:水
PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 桃醛(標(biāo)準(zhǔn)品)γ-Undecanolactone質(zhì)量規(guī)格:0.96
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S5甲基壬基甲酮(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Undecanone質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
DKKL1 Others Human 人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2′-脫氧胞苷 鹽酸鹽2′-Deoxycytidine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.99
膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL1酸氫二銨Ammonium phosphatedi basic質(zhì)量規(guī)格:SP
鼻鳥桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物-無血清MSCGS-25,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))5,5'-Thiodisalicylic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC))4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
COS-1 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
EB (NBL-4)細(xì)胞,牛胚氣管細(xì)胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型細(xì)胞) CM-H018人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鎘黃,英文名或英文縮寫:Cadmium sulfide,級(jí)別:AR,99.5%,規(guī)格:10克
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白鱗鉬醋銨 cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3
MKN-28(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芐氧羰基甘酸,英文名或英文縮寫:CBZ-L-Gly,級(jí)別:特,99%,規(guī)格:100克
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基PEpiCMFORMALDEHYDE-FREERNAGELKIT無RNA膠試劑盒RTsigma
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3374-22-9DL-半胱酸;DL-2-基-3-;DL-半膀胱基酸;DL-β-;DL-脬基酸DL-Cysteine
PCR檢測(cè)試劑盒:
鼻鳥桿菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。