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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4002 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書 | Moraxella bovisPCR | BKP4002 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)HISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITH18%ALCOHOL組織固定劑組織學(xué)級(jí)無色至微黃無混濁液體RTsigma
人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse1,4-二溴-2- 1,4-DibroMo-2-butqnq;trcns-1,4-DibroMo-2-butqnq 1981/6/7
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A3，5-二氧基本加醋酯 Mqthyl 3,5-dimqthoxybqnzoctq 120-37-0
人骨骼肌細(xì)胞 (HSkMC)( 5×105 )等離子體氧化酶，英文名或英文縮寫：PAO，級(jí)別：BR，50u/mg，規(guī)格：10克
CL-0243WI-38(人胚肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2BAIRD-PARKER瓊脂基礎(chǔ)Baird-Parker Agar Ba
FCER2 Others Rat 大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸米諾環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)Minocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24鹽酸米托蒽醌(進(jìn)分)Mitoxantrone HCl質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分sigma M6545
HLF-02細(xì)胞，人胚肺二倍體細(xì)胞 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-3H & 5H細(xì)胞 CM-M120小鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸米托蒽醌Mitoxantrone HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
SK-Hep-1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸米托蒽醌（標(biāo)準(zhǔn)品）Mitoxantrone HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HUVEC-c pooled 混合來源的人臍內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)咪唑立賓Mizoribine質(zhì)量規(guī)格：>98%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 貝那普利拉/苯那普利拉（標(biāo)準(zhǔn)品）Benazeprilat質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用
人微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL奧美拉唑硫化物Omeprazole Sulfide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
MLTC-1細(xì)胞，小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 KG-1(細(xì)胞) 人惡性色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]6-羥基氯唑沙宗6-Hydroxy Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)6-嘌呤6-Mercaptopurine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 7-甲基-6-嘌呤7-Methyl-6-Mercaptopurine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
QGY-7701細(xì)胞，細(xì)胞 人宮頸上皮細(xì)胞癌,Ski細(xì)胞 KM小鼠子瘤株;U27伊潘立酮-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Iloperidone-d3
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]亞胺培南一水合物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Imipenem Monohydrate
ULBP1 Others Human 人 ULBP1 / N2DL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-羥基吲達(dá)帕胺質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口5-Hydroxy Indapamide
人上皮細(xì)胞裂解物HBEpiCL脫氫吲達(dá)帕胺質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dehydro Indapamide
IL23R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) CHPS-Na；3-氯-2-羥基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>98.5%CHPS-Na
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
