產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4154 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
海藻巴斯德菌=海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒說明書 | Pasteurella trehalosi(=)PCR | BKP4154 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:海藻巴斯德菌=海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
20-Hydroxyecdysone 中文名:20-羥基蛻皮甾酮 分子式:C27H44O7 度:98.0% 兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Stigmasterol glucoside 中文名: 分子式:C35H58O6 度:97.0% 兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Stigmastane-3,6-diol 中文名: 分子式:C29H52O2 度:% 兔抗糖蛋白抗體elisa試劑盒 兔抗糖蛋白抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔抗糖蛋白抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗糖蛋白抗體試劑盒、兔抗糖蛋白抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
17α-Thevebioside 中文名: 分子式:C36H56O13 度:% 兔抗平滑肌抗體elisa試劑盒 兔抗平滑肌抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔抗平滑肌抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗平滑肌抗體試劑盒、兔抗平滑肌抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
α-Spinasterol acetate 中文名:α-菠甾醇乙酸酯 分子式:C31H50O2 度:96.0% 兔抗凝血酶elisa試劑盒 兔抗凝血酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔抗凝血酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗凝血酶試劑盒、兔抗凝血酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Salusin-α 英文名稱: Salusin-α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Salusin-α Parecoxib 中文名:帕瑞考昔鈉 分子式:C19H17N2NaO4S
S-100蛋白 英文名稱: S-100protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: S-100 4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 中文名:4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式:C28H18N2O2
Relax-ISOBloodDNAKitI 50ml(血量) Tranexamic acid 1197-18-8 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2
Rat von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 大鼠性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C16H15F2NO4
Rat vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒 (1R,2R)-1-Amino-2-indanol 163061-73-2 中文名:(1R,2R)-1-氨基-2-茚醇 分子式:C9H11NO
海藻巴斯德菌=海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒說明書大鼠周神經(jīng)成纖維細胞(RPNF)(5×105)麻楓樹酚酮B(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Jatropholone B
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS33β-乙酰氧基-7,25-甘遂二1-24(R)-醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol
615小鼠前瘤株;Fc 小鼠腎小管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL11-羥基柳杉酚(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品11-hydroxy-sugiol
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 MouseL-乳酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標準品L-(+)-Lactic acid
CDH16 Others Human 人 CDH16 / Cadherin-16 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀二聚體雜質(zhì)質(zhì)量規(guī)格:美國進口Simvastatin Dimer Impurity
615小鼠株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL1-本基-3-吡唑烷酮50U
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse2,4-二錄酚 2,4-Dichlorophqnol 10-83-
CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人細胞裂解液 (陽性對照) DEAE葡聚糖5克
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA鉍粒5克
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 6361-21-32-錄-5-硝基2-Chloro-5-nitno