產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4138 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
脫氮副球菌PCR檢測試劑盒說明書 | Paracoccus denitrificansPCR | BKP4138 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2-(Phenylmethoxy)-naphthalene 613-62-7 中文名:2-萘酚芐基醚 分子式:C17H14O 度:98.0% 小鼠核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒 小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠核因子κB受體活化因子配基eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-(Morpholinodithio)benzothiazole 95-32-9 中文名:2-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑 分子式:C11H12N2OS3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體elisa試劑盒 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline 109113-72-6 中文名: 分子式:C10H9ClN2 度:98.0% 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體elisa試劑盒 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine 139525-77-2 中文名: 分子式:C13H16ClNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠甲種胎兒球蛋白elisa試劑盒 小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒、小鼠甲種胎兒球蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid 70958-20-2 中文名: 分子式:C14H11ClO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠核因子kb(NF-kb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol 2215-96-5 中文名: 分子式:C11H14O5 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
Rabbitadramycin,ADRELISAKit兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine 89282-12-2 中文名: 分子式:C5H4N2O4
QSPlasmidMaxiKit 10T Tranexamic acid 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2
PlasmidMidiKit 100T trans-4-Aminocyclohexanol 27489-62-9 中文名: 分子式:C6H13NO
PlasmidMaxiKit 10T trans-4-Aminocyclohexanol 中文名: 分子式:C6H13NO
脫氮副球菌PCR檢測試劑盒說明書狗腎惡性癥細胞;DH827-(二乙基氨基)-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acid
THPO Others Human 人 Thrombopoietin / THPO / TPO / TPO 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-[4-(二苯基氨基)苯基]-3-羧酸乙酯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate
CL-0215SK-OV-3(人細胞)5×106cells/瓶×2熒光素二鉀質(zhì)量規(guī)格:熒光染料Uranine K
APOM Others Human 人 APOM 人細胞裂解液 (陽性對照) 熒光素二乙酸酯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)Fluorescein Diacetate
小鼠骨髓基質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mL6-羧基四甲基羅丹明;6-TAMRA質(zhì)量規(guī)格:≥90%;for fluorescence6-Carboxytetramethylrhodamine
ECE1 Others Human 人 ECE1 人細胞裂解液 (陽性對照) 血清兔抗人IgGshēng huà shì jì容量:250克
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R啊利新藍8GS cLCIcN BLUq 8GX 1633-92-3
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-環(huán)己基炳醋 Cyclohqxcnqpropionic ccid 701-97-3
人直平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL1shēng huà shì jì容量:RT10克
L1210細胞,小鼠細胞 多形擬桿菌 大額牛腎細胞;BFR-K1(1酸肌酸鈉)
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:脫氮副球菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。