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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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脫氮副球菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4138
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4138
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

脫氮副球菌PCR檢測試劑盒說明書

Paracoccus denitrificansPCR

BKP4138

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2-(Phenylmethoxy)-naphthalene  613-62-7  中文名:2-萘酚芐基醚  分子式:C17H14O  度:98.0%      小鼠核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒   小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠核因子κB受體活化因子配基eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

2-(Morpholinodithio)benzothiazole  95-32-9  中文名:2-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑  分子式:C11H12N2OS3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體elisa試劑盒   小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline  109113-72-6  中文名:  分子式:C10H9ClN2  度:98.0%      小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體elisa試劑盒   小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒、小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine   139525-77-2  中文名:  分子式:C13H16ClNO  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠甲種胎兒球蛋白elisa試劑盒   小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒、小鼠甲種胎兒球蛋白eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  

2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid  70958-20-2  中文名:  分子式:C14H11ClO3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠核因子kbNF-kbELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit
兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol  2215-96-5  中文名:  分子式:C11H14O5  度:關(guān)鍵詞:  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

Rabbitadramycin,ADRELISAKit兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine  89282-12-2  中文名:  分子式:C5H4N2O4 

QSPlasmidMaxiKit   10T  Tranexamic acid  中文名:凝血酸  分子式:C8H15NO2 

PlasmidMidiKit   100T                 trans-4-Aminocyclohexanol  27489-62-9  中文名:  分子式:C6H13NO 

PlasmidMaxiKit   10T  trans-4-Aminocyclohexanol  中文名:  分子式:C6H13NO
脫氮副球菌PCR檢測試劑盒說明書狗腎惡性癥細胞;DH827-(二乙基氨基)-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acid

THPO Others Human Thrombopoietin / THPO / TPO / TPO 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-[4-(二苯基氨基)苯基]-3-羧酸乙酯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate

CL-0215SK-OV-3(人細胞)5×106cells/瓶×2熒光素二鉀質(zhì)量規(guī)格:熒光染料Uranine K

APOM Others Human APOM 人細胞裂解液 (陽性對照) 熒光素二乙酸酯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)Fluorescein Diacetate

小鼠骨髓基質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mL6-羧基四甲基羅丹明;6-TAMRA質(zhì)量規(guī)格:≥90%;for fluorescence6-Carboxytetramethylrhodamine
ECE1 Others Human
ECE1 人細胞裂解液 (陽性對照) 血清兔抗人IgGshēng huà shì jì容量:250

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R啊利新藍8GS cLCIcN BLUq 8GX 1633-92-3

EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-環(huán)己基炳醋 Cyclohqxcnqpropionic ccid 701-97-3

人直平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL1shēng huà shì jì容量:RT10

L1210細胞,小鼠細胞 多形擬桿菌 大額牛腎細胞;BFR-K1(1酸肌酸鈉)

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:脫氮副球菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。


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