產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3988 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
石膏樣小孢子菌PCR檢測試劑盒價格 | Microsporum gypseumPCR | BKP3988 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:石膏樣小孢子菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1AMVREVERSETRANSCRIPTASE反轉(zhuǎn)錄酶生物技術(shù)級FROZENsigma
RKO細(xì)胞,腺癌細(xì)胞 人細(xì)胞系,SUME-a細(xì)胞 CL-0371K7M2 wt(小鼠成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2;1,4-二羌基丁烷 1,4-Butcnqdiol;1,4-Dixy7noxybutcnq;TqtrcMqthylqnq glycol
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA2-糠醋酯 Mqthyl 2-furoctq 611-13-
IL34 Others Mouse 小鼠 IL-34 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 高分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白,英文名或英文縮寫:High range protein MW marker,級別:BR,10u/mg,規(guī)格:1公斤
U-2 OS, 人細(xì)胞9000-70-8明膠;白明膠;動物膠;筋膠;銀明膠Gelatin;Puragel
H9c2(2-1) (大鼠心肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0344HAN(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 牛腎細(xì)胞;MDBK雙(標(biāo)準(zhǔn)品)Dicoumarol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠成纖維細(xì)胞;φ2水晶蘭苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Monotropein質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
17. 脂肪細(xì)胞系統(tǒng)水仙苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Narcissoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-R096大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLOSU03012OSU-03012(AR-12)質(zhì)量規(guī)格:>98%,有效的重組PDK-1抑制劑
小鼠細(xì)胞;L1210 小鼠食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL斯皮諾素(標(biāo)準(zhǔn)品)Spinosin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
石膏樣小孢子菌PCR檢測試劑盒價格TF Others Human 人 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-胸苷(dT);2'-脫氧胸苷Thymidine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
牛腦垂體提取物BPEDBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole] 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
GAP43 Others Human 人 GAP43 / Neuromodulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-(1-芘基)馬來(>97.0%(HPLC))N-(1-Pyrenyl)maleimide質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
CHL-Don 中國倉鼠肺成纖維樣細(xì)胞愛維莫潘Alvimopan質(zhì)量規(guī)格:刪除;精神管制
CL-0046C4-2(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-磺炳基十四烷基二甲甜菜堿Myristyl sulfobetaine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK-異鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isorhamnetin 3-sophoroside-7-rhamnoside
Chang liver細(xì)胞,CCL13張氏肝細(xì)胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293),APP-PS1細(xì)胞 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3(-)-Holostyligone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品(-)-Holostyligone
Lncap clone FGC(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25-羧基-X-羅丹明質(zhì)量規(guī)格:>97%5-Carboxy-X- rhodamine; 5-ROX
Promocell C-20111 Keratinocyte GrowthMedium 2 KIT, 角質(zhì)細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml,丙硫氧嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Propylthiouracil
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞HAECD-果糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品D-Fructose
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。