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【產(chǎn)品名稱】: 跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Louping Ill VirusRTPCR
【貨號】: BKP3950

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴綠-甲基紅指示劑芬枕，英文名或英文縮寫：metxyl Red mixed indicator powder，級別：BR，95%，規(guī)格：100克

人肺大內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL頭孢炳1(Z)-異構(gòu)體 Cqfprozil (Z)-IsoMqr 1141-77-9

SK-MEL-1細胞，人皮膚色素瘤細胞 德氏乳桿菌乳酸亞種 人十二脂腸腺癌;HuTu-80GUANIDINExy7noCHLORIDE,LOWASH鹽酸胍技術(shù)級白色至微黃色顆粒結(jié)晶粉末RTsigma

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 標簽)EDTA-2K乙二安四乙酸鉀25克高，73%

KG-1(人) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 69610-40-8Boc-L-脯醇(S)-(-)-1-Boc-2-pyrrolidinemetxanol
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標簽)鹽酸奈福泮（標準品）Nefopam HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測定

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細胞)甲睪酮; 甲基素（標準品）17-Methyltestosterone質(zhì)量規(guī)格：含量測定

原代上皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml布美他尼;丁苯氧酸（標準品）Bumetanide質(zhì)量規(guī)格：含量測定

BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氨甲環(huán)酸（標準品）Tranexamic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1氨甲環(huán)酸Tranexamic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標簽)多沙普侖Doxapram質(zhì)量規(guī)格：美國進口

BGC-803(人細胞) 5×106cells/瓶×2 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1奧沙利鉑（標準品）Oxaliplatin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

人肝內(nèi)膽管上皮細胞HIBEpiC硝酸奧昔康唑Oxiconazole Nitrate質(zhì)量規(guī)格：度>99%

SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸土霉素Oxytetracycline HCl質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2鹽酸土霉素(標準品)Oxytetracycline HCl質(zhì)量規(guī)格：效價測定
跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書PG細胞，人肺巨細胞癌 小鼠巨噬細胞,Ana-1細胞 CM-R119大鼠晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLR-羥基托吡酯質(zhì)量規(guī)格：美國進口R-Hydroxy Topiramate

RWPE1(人上皮細胞) 5×106cells/瓶×2S-羥基托吡酯質(zhì)量規(guī)格：美國進口S-Hydroxy Topiramate

Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kitD-鹽酸伐昔洛韋質(zhì)量規(guī)格：美國進口D-Valacyclovir Hydrochloride

人雪旺細胞總RNAHSC NA伐昔洛韋雜質(zhì)F質(zhì)量規(guī)格：美國進口Valacyclovir Impurity F

小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細胞(MM)(5×105)4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4,5-Difluorophthalonitrile
PCR檢測試劑盒

跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。