產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4101 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
諾如病毒5型PCR檢測試劑盒直銷【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 諾如病毒5型PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Norwalk Viruses G5(NV5)G5RTPCR
【貨號】: BKP4101
組成及試劑配制
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
諾如病毒5型PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
CLEC4A2 Others Rat 大鼠 CLEC4A2 / DCIR 人細胞裂解液 (陽性對照) RNase&DNase清除劑shēng huà shì jì容量:25克
微內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)二二醇單迷 2-(2-Mqthoxyqthoxy)qthcnol 111-77-3
Dami細胞,人巨核細胞保細胞 小鼠網(wǎng)織細胞,M5076細胞 上皮細胞生長添加物PEpiCGS鄰本二酸二正辛酯shēng huà shì jì容量:500克
NCI-H2227(人小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2CTX頭孢霉素1克BR,17Tabor u/mg
BSC-1(猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M062小鼠腎小管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL 人細胞;PC-3 [PC3]Locustbeangum 25g/100g/500g原裝 Sigma G0753
BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株米帕明/丙咪嗪(標準品)Clomipramine HCL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人急性早幼粒細胞;HL-60 大鼠上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸氫氯吡格雷 I型Clopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%,I型
原代平滑肌細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml硫酸氫氯吡格雷 II型(標準品)Clopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
FAS Others Cynomolgus 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸氫氯吡格雷 II型Clopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格:含量97.0%-101.5%,II型
中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24萘丁美酮/萘普酮Nabumetone質(zhì)量規(guī)格:>99%
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 MouseD-氨基葡萄糖鹽酸鹽D-Glucosamine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧卡西平Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR
人細胞;SMMC-7721奧卡西平(標準品)Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
3. 毛發(fā)細胞系統(tǒng)金絲桃素(標準品)Hypericin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠神經(jīng)干細胞D-葡萄糖-6-1酸D-(+)-Glucopyranose 6-phosphate質(zhì)量規(guī)格:1M in H2O(260Mg/ml),進口原裝
諾如病毒5型PCR檢測試劑盒直銷NIH:OVCAR-3細胞,細胞 人細胞,KYSR450細胞 豚鼠皮膚細胞;GP-S22',3'-O-異亞丙級-6-核苷嘌呤質(zhì)量規(guī)格:美國進口2',3'-O-Isopropylidene-6-mercaptopurine riboside
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A12-氨基-6-羥基-8-嘌呤質(zhì)量規(guī)格:美國進口2-Amino-6-hydroxy-8-mercaptopurine
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-6-嘌呤-9-D-核苷水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口2-Amino-6-mercaptopurine-9-D-riboside Hydrate
人心肌細胞-RNAHCM-a miRNA5 μgS-甲基-3-硫代對乙酰氨基酚質(zhì)量規(guī)格:美國進口S-Methyl-3-thioacetaminophen
HEPACAM2 Others Rat 大鼠 HepaCAM2 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-羥基奈韋拉平質(zhì)量規(guī)格:美國進口2-Hydroxy Nevirapine
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。