產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4094 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 豚鼠耳炎諾卡菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Nocardia otitidiscaviarumPCR
【貨號】: BKP4094
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
豚鼠耳炎諾卡菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
IL11RA Others Mouse 小鼠 IL11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) 柏木油,英文名或英文縮寫:Cedarwood oil,級別:CP,規(guī)格:25克
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11吲哚乙酸酯 Indoxyl acetate,≥95% 608-08-2 1G 通用試劑
XCL2 Others Human 人 XCL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-高絲安醋;L-類絲安醋;L-2-安基-4-羌基丁醋 L-HoMosqrinq;(S)-2-cMino-4-xy7noxybutyric ccid;Hsq 1967/12/1
CM-R118大鼠虹膜色素上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLL-鼠李糖500克
HNE2, 人細胞系 NIH SWISS小鼠胚細胞,NIH3T3細胞 A673(橫紋肌瘤細胞)533-68-6α-溴乙酯DL-etxyl 2-bromobutyrate
Calu-3 人(胸膜滲出液)順式-α-羥基它莫西芬cis-α-Hydroxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進口
BGC-823-EGFP-puro人細胞 Human gasic cancer cells BGC-823-EGFP-puro 1640+10% Hyclone滅活血清+2ug/ml puromycinN-氧基它莫西芬Tamoxifen-N-oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
BMP2 Protein Human 重組人 BMP-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)α-羥基它莫西芬α-Hydroxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人微內(nèi)皮細胞 (HCMEC)( 5×105 ) SF9, 昆蟲卵巢細胞 其它N-去甲基-4'-羥基它莫西芬N-Desmethyl-4'-hydroxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠紅細胞;MELN-去甲基它莫西芬鹽酸鹽N-Desmethyl Tamoxifen Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進口
豚鼠耳炎諾卡菌PCR檢測試劑盒說明書綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細胞;U14-GFPN-甲基-D-天門冬氨酸N-Methyl-d-Aspartic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA 腹水瘤細胞,SAC-IIB2細胞 VMR106細胞,大鼠細胞D-四氫藥根堿(標(biāo)準品)(R)-(+)-Corypalmine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品
人胚肺二倍體細胞;2BSD-醇(標(biāo)準品)D-Pinitol質(zhì)量規(guī)格:95%,標(biāo)準品
CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人細胞裂解液 (陽性對照) 果菊苷(標(biāo)準品)Echinacoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品
破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)蘿酸(標(biāo)準品)Usnic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品
MDA-MB-453(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2Ursolicacid3-羥基-(3β)-烏索12-1-28-酸5克BR,85%
Promocell C-22162 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2 KIT, 平滑肌細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml3-基-2-本并噻坐啉同 3-MqTHYL-2-BqNZOTHIcZOLINONq HYDRcZONq xy7noCHLORIDq 4338-98-1
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細胞裂解物HCPECLToluidinepule胺蘭100毫克BR,98%
RSPO3 Others Human 人 RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 人細胞裂解液 (陽性對照) Indium銦100毫升AR,98.5%
CatL1 家貓肺成纖維樣細胞111-87-5正辛醇1-Octanol reagentplus
PCR檢測試劑盒:
豚鼠耳炎諾卡菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。