|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4091 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Nocardia carneaPCR | BKP4091 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)*5G1609-47-8COLD
人細(xì)胞;HOS本安;啊泥林;啊泥林油;安基本 cnilinq;cMinobqnzqnq;PhqnylcMinq 6-23-3
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] T細(xì)胞細(xì)胞，HuT78細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細(xì)胞，貂肺上皮細(xì)胞Neutralred堿性紅51克超，99%
SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細(xì)胞系 Human青霉素鏈霉素兩性霉素B溶液，英文名或英文縮寫：Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated，級(jí)別：高，90%，適合電泳，規(guī)格：750U
LCN1 Others Human 人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 霧抑制劑Chromium-fog inhibitor
CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白 (His 標(biāo)簽)正十三烷基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 Cardioophin-1 / CTF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 辛二酸(>98%,BR)Octanedioic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
豬腎細(xì)胞;PK(15)橄欖油Olive oil質(zhì)量規(guī)格：商品級(jí)
TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鄰甲氧基肉桂醛(>98%,BR)o-Methoxycinnamaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)苔紅素（合成）Orcein, synthetic質(zhì)量規(guī)格：BS
肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)人星形膠質(zhì)細(xì)胞氘代苯-D6(10g )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%
人胚肺二倍體細(xì)胞;HL 人小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氘代苯-D6(10g )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%+0.03%TMS
人類原巨核細(xì)胞型細(xì)胞;UT-7氘代苯-D6(25g)Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%
LAG3 Others Rat 大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氘代苯-D6(50g)Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%
CM-R026大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL氘代苯-D6(100g )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.5%
大鼠尿道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鈧氧，英文名或英文縮寫：Scandium oxide，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：100克
SHZ-88大鼠癌細(xì)胞 Breast cancer cells of SHZ-88 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS典化銨;典化铔 cMMoniuM iodidq 107-06-4
IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)馬尿酰-組酰-亮酸，英文名或英文縮寫：N-Hippuryl-His-Leu hydrate，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克
Hep B1.2(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 志賀氏菌1,1,2-三扶-1,2,2-三錄，英文名或英文縮寫：1,1,2-Trichlorotrifluoroethane，級(jí)別：CP，99.5%，規(guī)格：1公斤
氣道平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Bilesalt 25g/1kg 國產(chǎn)
