產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3907 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Isospora suisPCR | BKP3907 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
tTA基因修飾的小鼠細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1磺酰酸鎳,英文名或英文縮寫:Nickel sulfamate,級別:高,98%,規(guī)格:1克
ERBB2 Others Mouse 小鼠 ErbB2 / HER2 / CD340 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-基-5-肖基本加醋 2-Mqthyl-5-nitnobqnzoic ccid 1972/2/6
LCC1 人癌細(xì)胞艾狄密新,英文名或英文縮寫:Erythromycin,級別:BR,10u/mg,規(guī)格:5克
HCC1937人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line HCC1937 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS十二酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium dodecanoate,級別:超,99%,規(guī)格:1克
EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)27565-41-9二硫代蘇糖醇1 4-DITHIO-DL-THREITOL(+4℃)
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 小鼠精母細(xì)胞,GC-2spd細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細(xì)胞)無水1酸二氫鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Dihydrogen Phosphate Anhydrous質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
人類原巨核細(xì)胞型細(xì)胞;UT-7長春西?。?biāo)準(zhǔn)品)Vinpocetine質(zhì)量規(guī)格:含量測定
CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 枸櫞酸鉍雷尼替?。?biāo)準(zhǔn)品)Ranitidine bismuth 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA丹曲林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Dantrolene hemiheptahydrate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC-os)(懸浮生長)呱西替柳(標(biāo)準(zhǔn)品)Guacetisal質(zhì)量規(guī)格:含量測定
豬等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)SUNE-1細(xì)胞,低分化細(xì)胞系 鼠色素瘤細(xì)胞系,B16-Fo細(xì)胞 CM-H031人食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)Carbendazim solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Cbz-L-蘇氨酸芐酯N-Cbz-L-threonine Benzyl Ester質(zhì)量規(guī)格:0.98
Promocell C-26140 Placeal Epithelial CellGrowth Medium KIT, 胎盤上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml(+)-2-甲基-L-絲氨酸(+)-2-Methyl-L-serine質(zhì)量規(guī)格:0.99
腦微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3,3-二苯基-L-丙氨酸3,3-Diphenyl-L-alanine質(zhì)量規(guī)格:0.98
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) α-甲基-L-苯丙氨酸α-Methyl-L-phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:98%,BR,一水物
人食道平滑肌細(xì)胞cDNAHESMC cDNA9-去氧-9a-氮雜-同型紅霉素A 去甲阿奇霉素質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口9-Deoxo-9a-aza-9a-homo Erythromycin A Desmethyl Azithromycin
COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿奇霉素質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Azithromycin
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1阿奇霉素-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Azithromycin-d3
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2 胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液) 10mLΔ6,7-巴卡丁 III質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Δ6,7-Baccatin III
MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 Human(R)-奧美拉唑鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(R)-Omeprazole Salt
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。