產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3902 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
【產品名稱】: 甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Influenza Virus ARTPCR
【貨號】: BKP3902
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
T-112B胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL纖粘連蛋白shēng huà shì jì容量:RT1克
CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-溴-2-典嘧啶 5-Bromo-2-iodopyrimidinq 183438-4-6
上皮細胞生長添加物EpiCGS維生素A棕櫚酸酯shēng huà shì jì容量:10克
Hs 578T細胞,人成纖維細胞 人原胚腎轉化細胞系,293 Ad5+細胞 胰島β細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)戊二酸5克
雪羊皮膚細胞;SSHS1(番紅O)
MuM-2B細胞,人眼脈絡色素瘤細胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受體細胞株;A7d炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide質量規(guī)格:美國進口
趨化因子3-O-甲基 4-羥基雌二醇3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol質量規(guī)格:美國進口
LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 17α-雌二醇-16,16,17-d317α-Estradiol-16,16,17-d3質量規(guī)格:美國進口
小耳豬肺細胞;SEP-L2炔雌醇-2,4,16,16-d4Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4質量規(guī)格:美國進口
人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )炔雌醇3-硫酸鹽Ethynyl Estradiol 3-Sulfate質量規(guī)格:美國進口
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 細胞,P3X63Ag8.653細胞 RN-c細胞,大鼠皮層神經(jīng)元細胞殺螟丹(標準品)Aramite質量規(guī)格:分析標準品,99%
人臍內皮細胞;HUV-EC殺螟丹標準溶液(100μg/ml,u=3%)Aramite solution質量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
LIFR Others Mouse 小鼠 LIFR / CD118 人細胞裂解液 (陽性對照) Amberlite?IRA402 強堿型陰離子交換樹脂(氯型)Amberlite? IRA402質量規(guī)格:氯型
腦動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)Amberlite® XAD1180N質量規(guī)格:粒徑0.350 - 0.600 mm
CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 嘧菌酯(標準品)Azoxystrobin質量規(guī)格:分析標準品
甲型病毒通用PCR檢測試劑盒說明書CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十七烷shēng huà shì jì容量:保存:-20℃500毫克
兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)無水錄化(II) CHROMIUM(II) CHLORIDq 10049-02-2
QG-56細胞,人肺扁平上皮癌細胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株,CHO-K1細胞 CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL聚乙二醇 12000 Poly(ethylene glycol) 12,000 (PEG 12000) 25322-68-3 500G 通用試劑
Saos-2(人細胞) 5×106cells/瓶×2赤霉素GA4+7shēng huà shì jì容量:RT5克
Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 setDicamba 1g/5g Sigma 523844
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。