產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3877 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
同禽病毒1型雞喉病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Infectious Laryngotracheitis Virus(ILTV,1)PCR | BKP3877 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7Streptozotocin鏈脲菌佐素超級1G18883-66-4
NCF2 Others Human 人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 生物速 Biotin 28-82-2
小氣道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-SERINEL-絲酸美國藥典級500G56-45-1RT
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4 人軟組織細(xì)胞,TE 115.T細(xì)胞 Eca-109(細(xì)胞)L-甘-甘-異白三肽100克RT,避光
人小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209Peptonepeef 500g 國產(chǎn)
PG-LH7細(xì)胞,人肺巨細(xì)胞癌(PG)的低轉(zhuǎn)移亞系 小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞,ψ2細(xì)胞 CL-0026ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四溴雙酚A雙(2-羥乙基)(>93.0%(GC))Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(GC)
ST(豬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24,4'-(六氟異亞丙基)二酞1(>98.0%(GC)(T))4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
HDMEC-c pre-screened 人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)預(yù)選型 500,000cells 肝實質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(T)
胃粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)三環(huán)[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ε-己內(nèi)酯(>99.0%(GC))ε-Caprolactone質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
同禽病毒1型雞喉病毒PCR檢測試劑盒直銷marc-145-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)猴胚胎腎上皮細(xì)胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin1,4,5,8-萘四甲?;?/span>(>97.0%(N))1,4,5,8-Naphthalenetetracarboxdiimide質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(N)
PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)3,4,9,10-苝四甲酰二亞胺(>95.0%(N))3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Diimide質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N)
人氣管上皮細(xì)胞(HTEpiC)(5×105 ) MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse9,10-二(1-萘基)蒽(>98.0%(HPLC))9,10-Di(1-naphthyl)anthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
貓腎細(xì)胞;CRFK2,3,6,7,10,11-六(己氧基)苯并菲(>98.0%(HPLC))2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二萘嵌苯(>98.0%(GC))Perylene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
人臍動脈平滑肌細(xì)胞總RNAHUASMC NA低碳硫鐵助溶劑shēng huà shì jì容量:RT,避光5克
MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,2,4-三基務(wù)烷;異忻烷 2,2,4-TriMqthylpqntcnq 240-84-1
人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLshēng huà shì jì容量:RT25克
PA317細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞 A10(大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞) 小鼠細(xì)胞;Sp2/0-Ag14苞肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:100毫升
CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)1041-01-63,5-二-L-甲腺酸(-20°C)3,5-Diiodo-L-thyronine
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:同禽病毒1型雞喉病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。