產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3854 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人鼻病毒14PCR檢測試劑盒說明書 | Human Rhinovirus 14 14 PCR | BKP3854 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
FCGRT & B2M Others Rat 大鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 五氧化二鈳,英文名或英文縮寫:Niobium(V) oxide,級別:BR,45%,規(guī)格:500毫克
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-磺基苯酐 2-Sulfobenzoic anhydride,98% 1981-8-3 25G 通用試劑
GES-1人胃上皮細胞 Human gasic epithelial cell GES-1 1640+10% FBSLiChroCcRT@250-4
IFNA5 Protein Rat 重組大鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標簽)三鹽酸亞精胺shēng huà shì jì容量:25克
KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞()) 5×106cells/瓶×2 破桿菌/梭菌Closidium tetani535-11-52-溴乙酯;α-溴乙酯etxyl 2-broMopropionate;etxyl 2-broMopropanoate
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 198-462, His 標簽)新補骨脂異黃酮(標準品)Neobavaisoflavone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1 B16-F10, 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞 Mouse新橙皮苷(標準品)Neohesperidin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠色素瘤瘤株;B16新穿心蓮內(nèi)酯(標準品)Neoandrographolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
EDA2R Others Mouse 小鼠 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 新芒果苷(標準品)Neomangiferin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL熊果苷(標準品)Arbutin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人鼻病毒14PCR檢測試劑盒說明書非洲綠猴腎細胞;CV-1GSK2636771GSK-2636771質(zhì)量規(guī)格:>97%,PI3Kβ選擇性抑制劑
IL17RD Others Human 人 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照) D-葡糖糖-6-1酸二鈉二水D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3丁二酸鈉(AR) succinate質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 牛血紅蛋白Hemoglobin質(zhì)量規(guī)格:BR
膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL聚乙二醇10000PEG 10000質(zhì)量規(guī)格:分子量9,000~11,000
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2(1S,4R)鹽酸舍曲林質(zhì)量規(guī)格:美國進口(1S,4R) Sertraline Hydrochloride
HCAEC-c 人內(nèi)皮細胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)氨基他達那非質(zhì)量規(guī)格:美國進口Amino Tadalafil
視網(wǎng)膜muller細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸特拉唑嗪質(zhì)量規(guī)格:美國進口Terazosin hydrochloride
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-芐基咪唑啉質(zhì)量規(guī)格:美國進口2-Benzylimidazoline
雜交瘤(B類);C3110D2B2氨基阿苯達唑砜質(zhì)量規(guī)格:美國進口Aminoalbendazole Sulfone
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人鼻病毒14PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。