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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3824 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人病毒通用PCR檢測試劑盒價格 | Human Herpesvirus RTPCR | BKP3824 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL2核糖核酸鈉鹽(酵母)100克
FIGF Others Mouse 小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,5-吡嗪二羧醋 2,5-PYRcZINqDICcRBOXYLIC cCID DIHYDRcTq 0269-63-3
人胰島β細胞完全培養(yǎng)基 100mL低聚果糖100克
RD細胞,人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞 屎腸球菌 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich1,2-本500克
CCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標簽)446-48-02-扶溴芐2-Fluorobenzyl bromide
U-937細胞,瘤細胞 人細胞,DU-145細胞 人間充質干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA鐵標準溶液(1000mg/L,溶劑:5%鹽酸) Iron solution質量規(guī)格:1000mg/L,溶劑:5%鹽酸
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B鐵標準溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸) Iron solution質量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽酸
ESAM Others Human 人 ESAM 人細胞裂解液 (陽性對照) 鐵標準溶液(100μg/mL(20°C),基體:5%HCl) Iron Standard質量規(guī)格:100μg/mL(20°C),基體:5%HCl
小鼠瘤株;H22銦標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸)Indium standard質量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 銦標準溶液(100mg/L(20℃),基體:1%HCl)Indium standard質量規(guī)格:100mg/L(20℃),基體:1%HCl
人病毒通用PCR檢測試劑盒價格NCI-H661細胞,大細胞細胞 人細胞,HONE1細胞 CL-0301M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2D-胱氨酸D-Cystine質量規(guī)格:0.98
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1D-阿拉伯糖醇D(+)-Arabitol質量規(guī)格:>98%,BR
PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 米吐爾(>98%,BC)Metol質量規(guī)格:>98%,BC
膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸吡哆醛Pyridoxal hydrochloride質量規(guī)格:>98%,BR
IFNG Others Rat 大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照) 硅油Silicone oil質量規(guī)格:BR
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照) N-二乙基亞硝,英文名或英文縮寫:N-nitnosodietxylamine,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
人肝臟間充質干細胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽 2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑
TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L(+)樹膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0
VERO細胞衍生株;SVP偶氮脒類引發(fā)劑V50shēng huà shì jì容量:2~8℃1克
CGM1細胞,EB病毒轉化的B細胞 人結直腸腺癌細胞,LS174T細胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL1,8-桉樹腦Cineole
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人病毒通用PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。