產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3824 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Human Herpesvirus RTPCR | BKP3824 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL2核糖核酸鈉鹽(酵母)100克
FIGF Others Mouse 小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,5-吡嗪二羧醋 2,5-PYRcZINqDICcRBOXYLIC cCID DIHYDRcTq 0269-63-3
人胰島β細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL低聚果糖100克
RD細(xì)胞,人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 屎腸球菌 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich1,2-本500克
CCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)446-48-02-扶溴芐2-Fluorobenzyl bromide
U-937細(xì)胞,瘤細(xì)胞 人細(xì)胞,DU-145細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,溶劑:5%鹽酸) Iron solution質(zhì)量規(guī)格:1000mg/L,溶劑:5%鹽酸
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸) Iron solution質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽酸
ESAM Others Human 人 ESAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL(20°C),基體:5%HCl) Iron Standard質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL(20°C),基體:5%HCl
小鼠瘤株;H22銦標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸)Indium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 銦標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L(20℃),基體:1%HCl)Indium standard質(zhì)量規(guī)格:100mg/L(20℃),基體:1%HCl
人病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格NCI-H661細(xì)胞,大細(xì)胞細(xì)胞 人細(xì)胞,HONE1細(xì)胞 CL-0301M-NFS-60 (小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2D-胱氨酸D-Cystine質(zhì)量規(guī)格:0.98
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1D-阿拉伯糖醇D(+)-Arabitol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 米吐爾(>98%,BC)Metol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸吡哆醛Pyridoxal hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IFNG Others Rat 大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硅油Silicone oil質(zhì)量規(guī)格:BR
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-二乙基亞硝,英文名或英文縮寫:N-nitnosodietxylamine,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克
人肝臟間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽 2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑
TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L(+)樹膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0
VERO細(xì)胞衍生株;SVP偶氮脒類引發(fā)劑V50shēng huà shì jì容量:2~8℃1克
CGM1細(xì)胞,EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1,8-桉樹腦Cineole
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:人病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。