產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3719 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鐮刀菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Fusarium spp.PCR | BKP3719 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞3,3',5,5'-TETRAmetxYLBENZIDINE(TMB)LIQUID-1COMPONENTTMB 溶液生物技術(shù)級1L
THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)鱗醋銨;卑鱗醋銨;亞鱗醋銨 cMMoniuM hypophosphitq 7803-62-8
人張氏肝細(xì)胞;Chang liver 人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLHydrmonoxy7nochloride單鹽酸鹽25克BR,98%
Saos-2,人成細(xì)胞GIEMSASTAIN吉姆色素染料生物染料級綠色粉末RTsigma
ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 614-10-84-(2-甲基本基)-3-基4-(2-metxYLpxenYL)-3-THIOSEMICARBAZIDE
兔主動脈平滑肌細(xì)胞;SMC三尖杉堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Cephalotaxlen質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 遼東楤木皂苷Ⅹ(標(biāo)準(zhǔn)品)Araloside Ⅹ質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)硫酸氨基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)Glucosamine sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36 人細(xì)胞,NCI-H1299細(xì)胞 A-431(表皮癌細(xì)胞)硫酸黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Coptisine Sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人低分化;GLC-82 [GLC82]硫酸軟骨素(標(biāo)準(zhǔn)品)Chondroitin sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
鐮刀菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16金石蠶苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Poliumoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人平滑肌細(xì)胞 (HBSMC)( 5×105 )金絲桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Hyperoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0268COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×26-甲氧基-2-萘乙酮(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Acetyl-6-methoxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格:TLC法檢查
人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A 大鼠腦動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL苯丙氨酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Phenprobamate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
MLA144 MLA144長臂猿瘤細(xì)胞哈西奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)Halcinonide質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL0.5ml離心管盒shēng huà shì jì容量:保存:-20℃25KU
ZA6細(xì)胞,轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞 WI-38(人二倍體胚肺細(xì)胞) 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K11酸1醇酸單環(huán)... Phospho(enol)pyruvic acid cyclohexylam... 10526-80-4 100MG 通用試劑
EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標(biāo)簽)言醋吉西他濱 GqMcitcbinq xy7nochloridq 1111-03-9
BC-009(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyteCHLORTETRACYCLINExy7noCHLORIDE鹽酸金霉素美國藥典級黃色結(jié)晶粉末COLDsigma
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH111-40-0二三胺Dietxylenetriamine
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:鐮刀菌通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。