產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3518 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
波薩達(dá)斯球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | Coccidioides posadasiiPCR | BKP3518 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:波薩達(dá)斯球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
土壤中性0酸酶(S-NP)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
土壤中性0酸酶(S-NP)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-Aminobenzophenone 1137-41-3 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
土壤蔗糖酶(S-SC)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid 中文名:4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S
土壤硝態(tài)氮測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Triamcinolone acetonide 76-25-5 中文名:曲安奈德 分子式:C24H31FO6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
土壤纖維素酶(S-CL)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Aminoantipyrine 1983/7/8 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
Rubioncolin C 中文名: 分子式:C27H22O6 度:98.0% 兔子白三烯B4elisa試劑盒 兔子白三烯B4試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子白三烯B4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子白三烯B4試劑盒、兔子白三烯B4 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Danshenxinkun A 中文名:丹參新醌甲 分子式:C18H16O4 度:98.0% 人組織相容性2-K1-K區(qū)elisa試劑盒 人組織相容性2-K1-K區(qū)試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人組織相容性2-K1-K區(qū)試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織相容性2-K1-K區(qū)試劑盒、人組織相容性2-K1-K區(qū)elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Przewaquinone A 中文名:紫丹參甲素 分子式:C19H18O4 度:98.0% 兔(rabbit NO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Deoxyneocryptotanshinone 中文名: 分子式:C19H22O3 度:97.5% 兔合酶(rabbit NOS) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
甾體 兔神經(jīng)元烯醇化酶(rabbit NSE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
波薩達(dá)斯球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書鹽酸阿糖胞苷 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱RatNOELISAKit大鼠(NO)ELISA規(guī)格:96T/48T
鹽酸阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 寡核苷酸探針?lè)峭凰?/span>HRP-DAB顯色法DNA南方雜交完全試劑盒5
鹽酸馬尼地平 Manidipine Dihydrochlorid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitPI人原規(guī)格:48T/96T
鹽酸馬尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品) Manidipine Dihydrochlorid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 ,英文名: HK ELISA Kit
二氫睪酮,雄諾龍 Stanolone/Androstanolone 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 大鼠P物質(zhì)(SP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatSubstanceP,SPELISAKit 96T/48T
多拉菌素 Doramectin 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 人程序性死亡-1(PD-1)試劑盒 Human PD-1 ELISA Kit
3,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸,塞羅寧 3,3',5'-Triiodo-L-thyronine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR RatSomatostatin,SSELISAKit大鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Corylifol A(標(biāo)準(zhǔn)品) Corylifol A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98,標(biāo)準(zhǔn)品 IP3R受體蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
芬酸鈉 Bromfenac 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Pisumsativumagglinin,PSAELISA試劑盒豌豆凝集素(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Bromfenac 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠幾丁質(zhì)酶1(CHIT1)ELISA試劑盒 ,英文名: CHIT1 ELISA Kit
豆甾醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Stigmasterol 質(zhì)量規(guī)格:95%,標(biāo)準(zhǔn)品,大豆來(lái)源 小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T
豆甾醇 Stigmasterol 質(zhì)量規(guī)格:>90 %,GC 小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒 ,英文名: u-T4 ELISA Kit
豆甾醇 Stigmasterol 質(zhì)量規(guī)格:>90%,GC 小鼠高敏三甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit 96T/48T
硝呋烯腙鹽酸鹽 Nitrovin HCL,Difurazone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: u-T3 ELISA Kit
杜鵑素(標(biāo)準(zhǔn)品) Farrerol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高遷移率族蛋白1(HMG1)ELISA試劑盒 ,英文名: HMG1 ELISA Kit
對(duì)香豆酸;對(duì)羥基肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品) p-Coumaric acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高遷移率族蛋白1(HMGB1)ELISA試劑盒 ,英文名: HMGB1 ELISA Kit
對(duì)葉百部堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Tuberstemonine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 ,英文名: HMGB-1 ELISA Kit
莪術(shù)醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Curcumol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 ,英文名: MHB ELISA Kit
莪術(shù)二酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Curdione 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR)ELISA試劑盒 ,英文名: MHBR ELISA Kit
蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品) Anthraquinone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠睪酮(T)ELISA試劑盒 ,英文名: T ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。