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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Cefotaxime   64485-93-4  中文名：頭孢噻肟鈉  分子式：C16H17N5NaO7S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠白介素-7(mouse IL-7)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Cefixime  79350-37-1  中文名：頭孢克肟  分子式：C16H15N5O7S2 

小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Cerebroside B  中文名：腦苷酯B  分子式：C41H77NO9 

小鼠白介素-7   英文名稱：    ierleukin-7   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-7  Daturametelin I  中文名：  分子式：C34H48O10 

小鼠白介素-6(mouse IL-6)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Cefixime  79350-37-1  中文名：頭孢克肟  分子式：C16H15N5O7S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
GUCA1A Others Human  GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 補(bǔ)骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Bakuchiol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)DL-beta-苯丙氨酸(>98%，BR)DL-beta-Phenylalanine質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞;WCF 卵巢，PA-1細(xì)胞 SK-OV-3(細(xì)胞)DL-肉堿鹽酸鹽DL-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

皮膚色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1DL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%，BC)DL-Ornithine, mono質(zhì)量規(guī)格：>98%，BC

EFNA3 Others Human  EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-1酸(>99%,BP)DL-Tartaric acid hydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BP
ICOS Others Mouse 小鼠 ICOS / AILIM / CD278 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 辛辣內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）Pungiolide A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CNE-2 低分化細(xì)胞麻楓樹酚酮B（標(biāo)準(zhǔn)品） Jatropholone B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

BxPC-3原位*腺癌細(xì)胞 BxPC-3 in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二1-24(R)-醇（標(biāo)準(zhǔn)品）3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

FASLG Protein Human 重組 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 (His 標(biāo)簽)11-羥基柳杉酚（標(biāo)準(zhǔn)品）11-hydroxy-sugiol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

*成纖維細(xì)胞( HCF) ( 5×105 ) GC-1, 鼠精原細(xì)胞 MouseL-乳酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-(+)-Lactic acid質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1-Methyl-L-4,5-dihydroorotic acid  103365-69-1  中文名：1-甲基-L-4,5-二氫乳清酸  分子式：C6H8N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠乙酰膽堿   英文名稱：   Mouse Acetylcholine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ACH

1-Methyl-aminomethyl naphthalene  14489-75-9  中文名：  分子式：C12H13N  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

1-Methyl-5-nitro-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-72-4  中文名：  分子式：C14H17N3O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

1-Methyl-5-amino-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-73-5  中文名：  分子式：C14H19N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）1-Methyl-3-nitrophthalate  21606-04-2  中文名：  分子式：C9H7NO6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝