產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63260 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
病毒H5亞型PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法) |
50T |
BK-P63260 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)液 Product name said 3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid 196404-55-4 中文名: 分子式:C22H25NO6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)*試劑盒 48T 3-Quinuclidinone 3731-38-2 中文名:3-奎寧環(huán)酮 分子式:C7H11NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1 英文名稱: Human Retinoblastoma Protein 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): RBP1 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 2397-00-4 中文名:4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪 分子式:C30H22N2O2
食品DNA提取試劑盒 50T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 103335-55-3 中文名: 分子式:C19H29NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
十六烷基基溴化胺 50g 3-O-Methyl-Estrone 1624-62-0 中文名:3-氧甲基基雌酮 分子式:C19H24O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
CaEs-17, 細(xì)胞株 癌細(xì)胞,SHZ-88細(xì)胞 SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](*橫紋肌肉癌細(xì)胞)敵草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Diuron
正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM3茜素紅質(zhì)量規(guī)格:ARAlizarin red
CD3D Others Human CD3D 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 十九酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Methyl nonadecanoate
SV-40轉(zhuǎn)化;WI38/VA13丙二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 Malonate
CLDN11 Others Human CLDN11 / Claudin-11 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-異抗壞血酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品D-(?)-Isoascorbic acid
BGC-823細(xì)胞,低分化細(xì)胞 腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,SW038-C2細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8甲地孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Megestrol base質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
COLO 320(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23-縮酮Estradiene dione-3-keta質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CD14 Others Human CD14 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 索拉非尼Sorafenib base質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4二1酸組胺;1酸組胺Histamine phosphate質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR
表皮色素細(xì)胞-中色素(HEM)( 5×105 )1酸氯喹,氯喹二1酸鹽Chloroquine diphosphate質(zhì)量規(guī)格:>98%
6-O-Methylcerevisterol 中文名: 分子式:C29H48O3 度:97.0% 兔素E1elisa試劑盒 兔素E1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔病毒H5亞型PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法)素E1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔素E1試劑盒、兔素E1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Daturataturin A 中文名: 分子式:C34H48O10 度:93.0% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體elisa試劑盒 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒、兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
8-Hydroxyodoroside A 中文名: 分子式:C30H46O8 度:96.0% 兔尿激酶型纖溶酶原激活物elisa試劑盒 兔尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒、兔尿激酶型纖溶酶原激活物elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
21-Deoxyneridienone B 中文名: 分子式:C21H28O3 度:% 兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3elisa試劑盒 兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒、兔細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Dehydroadynerigenin glucosyldigitaloside 中文名: 分子式:C36H52O13 度:98.5% 兔粒細(xì)胞集落刺激因子elisa試劑盒 兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒、兔粒細(xì)胞集落刺激因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR