產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3368 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
飾紋汀蛙虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Boheliridovirus(BIV)PCR | BKP3368 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:飾紋汀蛙虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
桿菌肽 50KU 4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine 中文名: 分子式:C7H7Cl2N3O2S 度:98.0%
肝脂酶/脂蛋白脂酶檢測(cè) Lipofuscin (excluding colorimeic detection) Racecadotril 中文名:消旋卡多曲 分子式:C21H23NO4S
肝素溶液 Heparin solion Ampicillin Trihydrate 7177-48-2 中文名:氨芐西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube Amoxicillin trihydrate 中文名:羥氨芐青霉素三水合物 分子式:C16H19N3O5S 度:98.0%
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube Amoxicillin trihydrate 中文名:羥氨芐青霉素三水合物 分子式:C16H19N3O5S
2,2-Diphenylglycine 3060-50-2 中文名: 分子式:C14H13NO2 人重去甲上腺素(NE-B)ELISA試劑盒
Phenytoin 57-41-0 中文名:苯妥英 分子式:C15H12N2O2 人生長(zhǎng)因子(TAF)ELISA試劑盒
Androstadienedione 897-06-3 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2 人相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒
Nandrolone 434-22-0 中文名:諾龍 分子式:C18H26O2 人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒
Guaiacol glycidyl ether 2210-74-4 中文名: 分子式:C10H12O3 人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISAKit
飾紋汀蛙虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格異槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Isoquercitrin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit 96T/48T
異茴芹內(nèi)酯 Isopimpinellin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒 Rat myeloperoxidase-aineuophil cytoplasmic aibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit
異類葉升麻苷;異毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Isoacteoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatneuropeptideYELISAKit大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)規(guī)格:96T/48T
異綠原酸A(標(biāo)準(zhǔn)品) Isochlorogenic acid A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 環(huán)境傷寒沙門氏菌(SalmonellaTyphi)定性試劑盒20
異綠原酸B(標(biāo)準(zhǔn)品) Isochlorogenic acid B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitTSLP人胸腺基質(zhì)細(xì)胞生成素規(guī)格:48T/96T
異綠原酸C(標(biāo)準(zhǔn)品) Isochlorogenic acid C 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TN1)ELISA試劑盒 ,英文名: TN1 ELISA Kit
異牡荊素(標(biāo)準(zhǔn)品) Isovitexin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandecay-acceleratingactivity,DAFELISAKit 96T/48T
異歐前胡素(標(biāo)準(zhǔn)品) Isoimperatorin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒 Rat Myeloperoxidase,MPO ELISA kit
異嗪皮啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Isofraxidin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatglialfibrillaryacidicproteinELISAKit大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
異去氫鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Isocorynoxeine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 環(huán)境傷寒沙門氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20
阿托伐他汀叔丁基酯 Atorvastatin tert-Butyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGhrelinELISAKit人生長(zhǎng)激素釋放肽(Ghrelin)規(guī)格:96T/48T
阿托伐他汀甲酯 Atorvastatin Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGlialCell-linederivedNeuroophicFactorELISAKit人膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)規(guī)格:96T/48T
氮卓斯汀-13C,d3 Azelastine-13C,d3 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanglialfibrillaryacidicproteinELISAKit人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)規(guī)格:96T/48T
N-去甲氮卓斯汀 N-Desmethyl Azelastine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGlp-1ElisaKit人胰高糖素肽(Glp-1)規(guī)格:96T/48T
(S)-鹽酸氮卓斯汀 (S)-Azelastine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGlycogenphosphorylaseBBELISAKit人糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(R)-鹽酸氮卓斯汀 (R)-Azelastine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGlycogenphosphorylaseIIELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II(GPII)規(guī)格:96T/48T
9-去氧-9a-氮雜-同型紅霉素A 去甲阿奇霉素 9-Deoxo-9a-aza-9a-homo Erythromycin A Desmethyl Azithromycin 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGlycogenphosphorylaseMMELISAKit人糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)規(guī)格:96T/48T
阿奇霉素 Azithromycin 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGlycoprotein96ELISAKit人排斥性抗原gp96(gp96)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿奇霉素-d3 Azithromycin-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱Humangp130solublefragmeELISAKIT人gp130規(guī)格:96T/48T
Δ6,7-巴卡丁 III Δ6,7-Baccatin III 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanGranulocyteChemotacticProtein-2ELISAKit人中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。