產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3364 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
芽生菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Blastomyces dermatitidisPCR | BKP3364 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:芽生菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
二氧化快速測(cè)試盒 dioxide rapid test case α-Spinasterol glucoside 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6
二氫二醇脫氫酶 英文名稱: Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DDH2 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 145163-97-9 中文名: 分子式:C29H48O2
二硫赤鮮醇 5g 3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式:C9H9N3O 度:98.0%
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣 4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride 106261-49-8 中文名:甲磺酸伊馬替尼 分子式:C13H20Cl2N2O2
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 25管/24樣 4,9-Dihydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O5 度:98.0%
5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 116856-18-9 中文名: 分子式:C7H9N3O3 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒
5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 73616-27-0 中文名: 分子式:C5H9N3O 人中期因子(MK)ELISA試劑盒
Imidazo[1,2-b]pyridazine 766-55-2 中文名: 分子式:C6H5N3 人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒
Fenazox 61618-27-7 中文名:氨芬酸鈉 分子式:C15H14NNaO4 人脂0壁酸(LTA)ELISA試劑盒
N-(2,6-Dimethylphenyl)-2-piperidinecarboxamide 27262-40-4 中文名: 分子式:C14H20N2O 人中期因子(MK)ELISAKit
芽生菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格蕓香柚皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Narirutin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitTI-Ag人胸腺非依賴性抗原規(guī)格:48T/96T
澤瀉醇B醋酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Alisol B 23-acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨鈣素(BGP)ELISA試劑盒 ,英文名: BGP ELISA Kit
獐牙菜苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sweroside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測(cè)試劑盒RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T
獐牙菜苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Swertiamarin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗原(UBC)試劑盒 Human urinary bladder cancer aigen,UBC ELISA Kit
樟腦(標(biāo)準(zhǔn)品) Camphor 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatVitaminK1,VK1ELISAKit大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芝麻林素(標(biāo)準(zhǔn)品) Sesamolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 P16蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5
芝麻素 Sesamin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR Porcineierleukin10,IL-10ELISA試劑盒豬白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芝麻素(標(biāo)準(zhǔn)品) Sesamin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)ELISA試劑盒 ,英文名: BMPRⅡ ELISA Kit
槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人結(jié)蛋白(Des)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandesmin,DesELISAKit 96T/48T
知母皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品) Timosaponin A3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC(ELSD)>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠酸性β葡萄糖苷酶(GBA)試劑盒 Rat glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit
阿齊沙坦 Azilsartan 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitEndostatin,ESELISAKit 96T/48T
阿齊沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Azilsartan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔子凝血酶受體()ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitthrombieceptor,ELISAKit 96T/48T
伊維菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Ivermectin 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T
SB431542,SB-431542 SB-431542 質(zhì)量規(guī)格:>98%TGF-β抑制劑 兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitCoisolELISAKit 96T/48T
米拉貝隆 Mirabegron 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitCoicosterone,COELISAKit 96T/48T
去氧紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品) Deoxyshikonin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 96T/48T
Tariquidar,XR-9576 Tariquidar,XR-9576 質(zhì)量規(guī)格:>98%,P-糖蛋白抑制劑 兔子素E1(PGE1)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitProstaglandinE1,PGE1ELISAKit 96T/48T
鈦黃;達(dá)旦黃;鈦鎳黃 Titan yellow 質(zhì)量規(guī)格:BS 兔子素E2(PGE2)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 96T/48T
雙水楊酯;水楊酸-2-羧基苯酯 Sasapyrine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T
雙水楊酯 ;水楊酸-2-羧基苯酯 Sasapyrine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitNervegrowthfactor,NGFELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。