產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3334 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
蠟樣芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Bacillus cereusPCR | BKP3334 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:蠟樣芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
β-N-乙酰基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒(比色法) 3-Allylrhodanine 1457-47-2 中文名:3-烯丙基羅丹寧 分子式:C6H7NOS2
β-(D3-H)測(cè)定試劑盒(酶比色法) 4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone 2549-87-3 中文名:4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮 分子式:C16H14O3
α-銀環(huán)蛇(α-BGT)ELISAKit Triptoquinone A 中文名: 分子式:C20H24O4
α-巖藻糖苷酶(AFU)測(cè)定試劑盒(速率法) Xanthopurpurin 518-83-2 中文名:1,3-二羥基蒽醌 分子式:C14H8O4
α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Atrazine 中文名:阿特拉津 分子式:C8H14ClN5
D-Tryptophan methyl ester hydrochloride 14907-27-8 中文名: 分子式:C12H15ClN2O2 rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
7-Methoxy-1-naphthaleneacetic acid 6836-22-2 中文名: 分子式:C13H12O3 CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格:48T/96T
Dehydrotolvaptan 137973-76-3 中文名: 分子式:C26H23ClN2O3 細(xì)菌異化型鹽還原酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Tolvaptan 150683-30-0 中文名:托伐普坦 分子式:C26H25ClN2O3 rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Abiraterone acetate 154229-18-2 中文名:乙酸阿比特龍酯 分子式:C26H33NO2 豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL12B ELISA Kit
蠟樣芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Uracil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 PorcineMelatonin,MTELISA試劑盒豬褪黑素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Uracil 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠膽(HDL-C)ELISA試劑盒 ,英文名: HDL-C ELISA Kit
丙胺肽林(標(biāo)準(zhǔn)品) Propantheline bromide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA檢測(cè)試劑盒RatNeuroglobin,NGBELISAKit 96T/48T
鹽酸妥洛特羅(標(biāo)準(zhǔn)品) Tulobuterol hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 人白介素5受體alpha(IL5RA)試劑盒 Human IL5RA ELISA kit
無(wú)水氫二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸拉貝洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Labetalol hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 pADEASY-pSHTLE+目的基因腺病毒
水楊酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Salicylamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 PorcineMethemoglobin,MHBELISA試劑盒豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
非普拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品) Feprazone 質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查 小鼠(HDL)ELISA試劑盒 ,英文名: HDL ELISA Kit
茴三硫;膽維他 Anethole trithione 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人γ肽(Pγ)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPeptideγ,PγELISAKit 96T/48T
茴三硫(標(biāo)準(zhǔn)品) Anethole trithione 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 Rat adrenomedullin,ADM ELISA Kit
Salpha羥基表藤黃酸 HPLC≥95% 20mg RatCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥基藤黃酸 HPLC≥95% 20mg Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雷公藤新堿 HPLC≥95% 20mg Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
衛(wèi)矛羰堿 HPLC≥95% 20mg RatcrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
洋地黃蒽醌 HPLC≥95% 20mg RatcrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O苯甲酰戈米辛O HPLC≥95% 20mg RatC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黑蔓定堿 HPLC≥95% 20mg RatC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Triptonine B HPLC≥95% 20mg RatC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit大鼠C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雷公藤寧堿A HPLC≥95% 20mg RatC-typenaiureticpeptide,CNPELISA試劑盒大鼠C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鬼箭羽堿,葉含衛(wèi)矛堿 HPLC≥95% 20mg RatCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T