產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3323 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
分歧巴貝斯蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Babesia divergensPCR | BKP3323 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:分歧巴貝斯蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Xanthopurpurin 518-83-2 中文名:1,3-二羥基蒽醌 分子式:C14H8O4 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
Xanthinol nicotinate 437-74-1 中文名:煙酸占替諾 分子式:C19H26N6O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit
Withaphysalin S 949172-13-8 中文名: 分子式:C29H40O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISAKit
Withaphysalin E 118985-24-3 中文名: 分子式:C28H34O7 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 中文名稱 方法 規(guī)格
Withaphysalin A 57423-72-0 中文名: 分子式:C28H34O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISAKit
Ganciclovir 82410-32-0 中文名:更昔洛韋 分子式:C9H13N5O4 HumanCystatinC,Cys-CELISA試劑盒人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Oxiracetam 62613-82-5 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3 組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
Piracetam 7491-74-9 中文名:吡拉西坦 分子式:C6H10N2O2 HumanpodocinELISAKit人PodocinELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Fudosteine 13189-98-5 中文名:福多斯坦 分子式:C6H13NO3S 豚鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 ,英文名: IFN-α ELISA Kit
Betaxolol hydrochloride 63659-19-8 中文名:鹽酸倍他洛爾 分子式:C18H30ClNO3 Human lung cancer marker DR-70 (DR-70TM) ELISA Kit 人標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒
分歧巴貝斯蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)富馬酸比索洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Bisoprolol fumarate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 96T/48T
馬來(lái)酸氨氯地平(標(biāo)準(zhǔn)品) Amlodipine maleate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 大鼠神經(jīng)肽W(NP-W)試劑盒 Rat Neuropeptide W,NP-W ELISA Kit
馬來(lái)酸氨氯地平 Amlodipine maleate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱RatPGE1ELISAKit大鼠素E1(PGE1)規(guī)格:96T/48T
二氟尼柳(標(biāo)準(zhǔn)品) Diflunisal 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒20
丹芝醇B(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderol B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitfgl2人纖維介素蛋白規(guī)格:48T/96T
丁二酸洛沙平(標(biāo)準(zhǔn)品) Loxapine succinate salt 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠肝脂酶(LIPC)ELISA試劑盒 ,英文名: LIPC ELISA Kit
幼枝含斷氧化馬錢(qián)子甙(標(biāo)準(zhǔn)品) Secoxyloganin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 96T/48T
醋酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 大鼠神經(jīng)肽Nesfatin-1 試劑盒 Rat Nesfatin-1 ELISA Kit
葡萄糖酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) gluconate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 英文名稱RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptideELISAKit大鼠葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸索他洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Sotalol hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 活體細(xì)胞脘蛋白去糖基化試劑盒20
O-芐基-L-酪氨酸芐酯鹽酸鹽 O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.985 人胱天蛋白酶10(CASP10)試劑盒 Human CASP10 ELISA Kit
O-芐基-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽 O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.985 人胱天蛋白酶12(Casp-12)試劑盒 Human Caspase 12,Casp-12 ELISA Kit
L-正纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽 L-Valine t-butyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 Human Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit
4-硝基-L-苯丙氨酸 4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人胱天蛋白酶-5(CASP5)試劑盒 Human CASP5 ELISA Kit
N-乙酰-DL-丙氨酸 N-Acetyl-DL-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人胱天蛋白酶8(Casp-8)試劑盒 Human Caspase 8,Casp-8 ELISA Kit
N-乙酰-DL-谷氨酸 Ac-DL-Glu-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒 Human Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit
DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸 DL-a-Aminoadipic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97%,混旋 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISAKit 96T/48T
DL-半胱氨酸鹽酸鹽,一水 DL-Cysteine·HCl·H2O 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)試劑盒 Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISA Kit
DL-胱氨酸鹽酸鹽 DL-Cysteine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)試劑盒 Human Cystatin-A,CSTA/STF1/STFA ELISA kit
DL-胱氨酸 DL-Cystine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)試劑盒 Human Cystatin-B,CSTB/CST6/STFB ELISA kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。