產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3322 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
犬巴貝斯蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Babesia canisPCR | BKP3322 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:犬巴貝斯蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Wright's-GiemsaStainingSolion 3-Amino-3-phenyl-1-propanol 14593-04-5 中文名:3-氨基-3-苯基-1-丙醇 分子式:C9H13NO
Umbelliferone 25g 4-Aminobenzophenone 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO
Tween80 250ml 4-Aminobutyric acid 1956/12/2 中文名:4-氨基丁酸 分子式:C4H9NO2
TMB 1g 4-(Phenylthio)benzyl alcohol 中文名: 分子式:C13H12OS
TMA 500g 4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 1533-45-5 中文名:4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式:C28H18N2O2
Ciprofloxacin hydrochloride 93107-08-5 中文名:鹽酸環(huán)丙沙星 分子式:C17H19ClFN3O3 rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Lincomycin hydrochloride 859-18-7 中文名:鹽酸林可霉素 分子式:C18H35ClN2O6S CLIAKitforBeta2-GP1AbIgA(HumanBeta2-Glycoprotein1aibodyIgA)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgA規(guī)格:48T/96T
Diphenhydramine hydrochloride 147-24-0 中文名:鹽酸苯海拉明 分子式:C17H22ClNO 細(xì)菌脂肪酶(LIPASE)活性定性染色試劑盒20次
hydrochloride 73-78-9 中文名:鹽酸利多卡因 分子式:C14H23ClN2O RabbitEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Levamisole hydrochloride 16595-80-5 中文名:鹽酸左旋咪唑 分子式:C11H13ClN2S 豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒 ,英文名: αHSG ELISA Kit
犬巴貝斯蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)拉西地平(標(biāo)準(zhǔn)品) Lacidipine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 ELISAKitTAFI人纖溶抑制因子規(guī)格:48T/96T
拉西地平 Lacidipine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 ,英文名: HL ELISA Kit
尼林(標(biāo)準(zhǔn)品) Nicergoline 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratfreefattyacids,FFAELISAKit 96T/48T
鹽酸賽洛唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品) Xylometazoline hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人白介素31(IL-31)試劑盒 Human IL-31 ELISA Kit
鹽酸賽洛唑啉 Xylometazoline hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISAKit人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二氫鉀(標(biāo)準(zhǔn)品) Potassium Dihydrogen Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:比色法含量測(cè)定 PAR-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
長(zhǎng)春胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Vincamine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸咪達(dá)普利(標(biāo)準(zhǔn)品) Imidapril Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒 ,英文名: L-FABP ELISA Kit
哌喹(標(biāo)準(zhǔn)品) Piperaquine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA檢測(cè)試劑盒RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T
西沙必利(標(biāo)準(zhǔn)品) Cisapride Monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 人白介素3(IL-3)試劑盒 Human Ierleukin 3 ELISA KIT
Op香豆?;登G素 HPLC≥98% 10mg MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA試劑盒小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O乙酰山椒子烯酮 HPLC≥98% 10mg MousecoagulationfactorⅩ,FⅩELISA試劑盒小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲烯基丁內(nèi)酯 GC≥95% 20mg Mousecoicoopieleasinghormone,CRHELISA試劑盒小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
金剛烷醇 HPLC≥98% 20mg MouseCoisolELISA試劑盒小鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
金剛烷酮 HPLC≥98% 20mg MouseCollagenaseIELISA試劑盒小鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙酰基洋丁香酚苷 HPLC≥98% 10mg MouseCollagenaseTypeIIELISA試劑盒小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,′二芥子?;崽?/span> HPLC≥98% 20mg MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,二苯甲?;闃侨嗜?/span> HPLC≥98% 10mg MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,',',四甲氧基二苯乙烯 GC≥98% 20mg MouseCollageypeⅣ,ColⅣELISA試劑盒小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,'O二甲基鞣花酸 HPLC≥98% 10mg MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA試劑盒小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T