產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3317 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
副雞禽桿菌PCR檢測試劑盒直銷 | Avibacterium paragallinarumPCR | BKP3317 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:副雞禽桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Withaperuvin C 81644-34-0 中文名: 分子式:C28H38O7 度:96.5% 關(guān)鍵詞: 酸漿屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒
Withanolide S 63139-16-2 中文名:醉茄內(nèi)酯S 分子式:C28H40O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄內(nèi)酯; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒
Withanolide C 108030-78-0 中文名:醉茄內(nèi)酯C 分子式:C28H39ClO7 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 細(xì)胞毒活性; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒
Wallicoside 88797-59-5 中文名:斷節(jié)參苷 分子式:C61H98O26 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒
Vildagliptin 274901-16-5 中文名:維達(dá)列汀 分子式:C17H25N3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit
5-Aminosalicylic acid 89-57-6 中文名:5-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3 CLIAKitforATA(HumanAngiotensinaseA)ELISAKit人緊張肽酶A規(guī)格:48T/96T
Norfloxacin 70458-96-7 中文名:諾氟沙星 分子式:C16H18FN3O3 線粒體復(fù)合物V蛋白共沉淀分析試劑盒5次
Indapamide 26807-65-8 中文名:吲達(dá)帕胺 分子式:C16H16ClN3O3S Rabbitadramycin,ADRELISAKit兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Loperamide hydrochloride 34552-83-5 中文名:鹽酸洛哌丁胺 分子式:C29H34Cl2N2O2 豚鼠Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6)ELISA試劑盒 ,英文名: KL-6 ELISA Kit
Nefopam hydrochloride 23327-57-3 中文名:鹽酸奈福泮 分子式:C17H20ClNO Human pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
副雞禽桿菌PCR檢測試劑盒直銷蒙脫石(標(biāo)準(zhǔn)品) Montmorillonit 質(zhì)量規(guī)格:鑒別 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA檢測試劑盒Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISAKit 96T/48T
佛手柑素;香檸檬素;佛手柑亭;香檸檬亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Bergamottin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒 Rat Nerve growth factor,NGF ELISA kit
鹽酸羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) Ropivacaine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 英文名稱RatCoisolELISAKit大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
番石榴苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Guaijaverin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 活體細(xì)胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒20
恩曲他濱(標(biāo)準(zhǔn)品) Emtricitabine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitPlg人纖溶酶原規(guī)格:48T/96T
恩曲他濱 Emtricitabine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,核苷逆轉(zhuǎn)錄酶(NRTI)抑制劑 小鼠肝素蛋白聚糖2(HSPG2)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPG2 ELISA Kit
肌酐(標(biāo)準(zhǔn)品) Creatinine 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 人神經(jīng)降壓素()ELISA檢測試劑盒HumanNeurotensin,ELISAKit 96T/48T
雙氯芬酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品) Diclofenac Potassium 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 大鼠血紅蛋白(HbCO)試劑盒 Rat Carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit
依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Exemestane 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 英文名稱MMP-1金屬基質(zhì)蛋白酶-1規(guī)格:96T/48T
鹽酸曲美他嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Trimetazidine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 副溶血性弧菌Vibrioparahaemolyticus)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20
N-乙?;前芳讗哼?/span> N-Acetyl Sulfamethoxazole 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatAngiogeninELISAKit大鼠生長素(Angiogenin)規(guī)格:96T/48T
磺胺甲惡唑 β-D-葡萄糖苷酸 Sulfamethoxazole β-D-Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatAngiopoietin-2ELISAKit大鼠生成素-2(ANG-2)規(guī)格:96T/48T
頭孢匹羅 Cefpirome 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatAngiopoietin-2ELISAKit大鼠生成素-2(ANG-2)規(guī)格:96T/48T
阿米舒必利-d5 Amisulpride-d5 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatangiotensinogenELISAKit大鼠緊張素原(aGT)規(guī)格:96T/48T
美羅培南碳酸鈉 Meropenem with carbonate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatangiotensinogenELISAKit大鼠緊張素原(aGT)規(guī)格:96T/48T
美羅培南鈉鹽 Meropenem Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatangiotensionIELISAKit大鼠緊張素I(AngI)規(guī)格:96T/48T
6,8-二甲氧基莫西沙星鹽酸鹽 6,8-Dimethoxy Moxifloxacin Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatangiotensionIELISAKit大鼠緊張素I(AngI)規(guī)格:96T/48T
8-乙氧基莫西沙星 8-Ethoxy Moxifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatansferrieceptorELISAKit大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格:96T/48T
8-去甲氧基-8-氟莫西沙星 8-Desmethoxy-8-fluoro Moxifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatansferrieceptorELISAKit大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格:96T/48T
外消旋順式-莫西沙星酰基-β-D-葡萄糖苷酸 rac cis-Moxifloxacin Acyl-β-D-glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱RatAquaporin0ELISAKit大鼠水通道蛋白0(AQP0)規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。