產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3311 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Avian Reticuloendotheliosis Virus(REV)RTPCR | BKP3311 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Valsartan methyl ester 137863-17-3 中文名: 分子式:C25H31N5O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血因子X 英文名稱: blood coagulation factor X 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FX
Valsartan 137862-53-4 中文名:纈沙坦 分子式:C24H29N5O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血因子XIII B 英文名稱: Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: F13B
Valnemulin hydrochloride 133868-46-9 中文名:鹽酸沃尼妙林 分子式:C31H53ClN2O5S 度:98.0% 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit
Valdecoxib 181695-72-7 中文名:帕瑞考昔 分子式:C16H14N2O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISAKit
Uzarigenin digitaloside 61217-80-9 中文名: 分子式:C30H46O8 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 夾竹桃; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISAKit
Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate 24922-02-9 中文名: 分子式:C8H12O3 HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISA試劑盒人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Mecobalamin 13422-55-4 中文名:甲鈷胺 分子式:C63H91CoN13O14P 組織HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次
Terbinafine hydrochloride 78628-80-5 中文名:鹽酸特比萘芬 分子式:C21H26ClN HumanPlatelet-DerivedGrowthFactor-BB,PDGF-BBELISAKit人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Domperidone 57808-66-9 中文名:多潘立酮 分子式:C22H24ClN5O2 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名: 分子式:C11H13N3S Rat vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒
禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)硝酸奧昔康唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxiconazole Nitrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 大鼠氧化抗體(OLAb)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 96T/48T
普瑞巴林(標(biāo)準(zhǔn)品) Pregabalin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒 Human IL-2sRα ELISA Kit
(S)-(+)-苯乙醇酸(普瑞巴林雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品) [(S)-(+)-MandelicAcid] (Pregabalin impurity) 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 英文名稱MouseTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)規(guī)格:96T/48T
山梨醇(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Sorbitol 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 PARP蛋白共沉淀分析試劑盒5
乙二醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethylene Glycol 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
降二氫辣椒堿 Nordihydrocapsaicin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒 ,英文名: GAPDH ELISA Kit
4-甲氨基安替比林(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-(Methylamino)-antipyrine 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit 96T/48T
硫酸肼(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydrazine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:供TLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒 Rat Epithelial neuophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit
硫酸肼(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydrazine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 英文名稱RatFIXELISAKit大鼠凝血因子IX規(guī)格:96T/48T
環(huán)扁桃酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclandelate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 活體細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(超氧陰離子)100
N-硝基-L-精氨酸甲酯 N'-Nitro-L-arginine-methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)試劑盒 Human asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
N-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE) N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit 96T/48T
AEBSF絲氨酸抑制劑 AEBSF HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人布盧姆綜合征蛋白(BLM)試劑盒 Human BLM ELISA Kit
AEBSF(進(jìn)分) AEBSF HCl 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分TCI A2215 人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)試劑盒 Human Brucella Aibody IgG,Brucella Ab IgG ELISA Kit
鹽酸貝他定(進(jìn)口) Bestatin HCl 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國(guó)進(jìn)口 人層連蛋白/板層素(LN)試劑盒 Human Laminin,LN ELISA KIT
鄰菲啰啉鹽酸鹽,一水 1,10-Phenanthroline hydrochloride monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99% 人層粘連蛋白-5(LN-5)試劑盒 Human Laminin-5,LN-5 ELISA Kit
膦酰二肽鈉 Phosphoramidon di salt 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人層粘連蛋白β1(LN-β1)試劑盒 Human Laminin β1,LN-β1 ELISA Kit
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷 Decyl β-D-glucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)試劑盒 Human LAMC2 ELISA Kit
德羅特韋(GSK-1349572,DTG) Dolutegravir,GSK1349572 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人腸道病毒71型(EV71)抗體(IgM)試劑盒 Human eerovirus 71 virus(EV71)aibody(gM)ELISA kit
十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂?;咸烟?/span> Dodecyl glucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人腸三葉因子(ITF)試劑盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。