產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3304 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
禽副粘病毒4型PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Avian Paramyxovirus 4(APMV)4RTPCR | BKP3304 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:禽副粘病毒4型PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Trimethoprim 中文名:甲氧芐啶 分子式:C14H18N4O3 魚類皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒
Trillin 中文名:延齡草苷 分子式:C33H52O8 魚類甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
Triethyl 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒
Tricetyl fingolimod 中文名: 分子式:C25H39NO5 魚糖胺聚糖(GAG)ELISA檢測試劑盒
Triamcinolone acetonide 中文名:曲安奈德 分子式:C24H31FO6 魚尿苷二0酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶(UDPGT)ELISA試劑盒
Stavudine 3056-17-5 中文名:司他夫定 分子式:C10H12N2O4 HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit 人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Albendazole 54965-21-8 中文名:阿苯達(dá)唑 分子式:C12H15N3O2S Humancytokeratin20,CK-20ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine 175291-56-2 中文名:Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯 分子式:C26H26NO8P 組織HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性檢測試劑盒20次
8-Phenyloctanol 10472-97-6 中文名:8-苯基辛醇 分子式:C14H22O HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
8-Phenyloctanoic acid 26547-51-3 中文名:8-苯基辛酸 分子式:C14H20O2 兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
禽副粘病毒4型PCR檢測試劑盒價(jià)格酸漿苦味素L(標(biāo)準(zhǔn)品) Physalin L 質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用 PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA試劑盒豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-甲基海因(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-METHYLHYDANTOIN 質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用 小鼠鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶B2(ATP2B2)ELISA試劑盒 ,英文名: ATP2B2 ELISA Kit
古倫賓(標(biāo)準(zhǔn)品) Columbin 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA檢測試劑盒Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 96T/48T
安五脂素(標(biāo)準(zhǔn)品) Anwuligan 質(zhì)量規(guī)格:鑒別 大鼠軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)試劑盒 Rat cailage oligomeric maix protein,COMP ELISA Kit
絡(luò)石苷(標(biāo)準(zhǔn)品) tracheloside 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 英文名稱RatTATELISAKit大鼠凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物(TAT)規(guī)格:96T/48T
竹節(jié)參皂苷IVa(標(biāo)準(zhǔn)品) chikusetsu saponin Iva 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用 活體組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒8/20
毛蘭素(標(biāo)準(zhǔn)品) 3'-Hydroxy-3,4,4',5-tetraMethoxybibenzyl 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用 ELISAKitCYP21A人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶規(guī)格:48T/96T
石斛酚(標(biāo)準(zhǔn)品) dendrophenol 質(zhì)量規(guī)格:鑒別 小鼠鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶A2(ATP2A2)ELISA試劑盒 ,英文名: ATP2A2 ELISA Kit
洋艾素(標(biāo)準(zhǔn)品) ABSINTHIN 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用 人抗肌動蛋白抗體(AAA)ELISA檢測試劑盒Humanai-Actinaibody,AAAELISAKit 96T/48T
α-常春藤皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品) α-hederin 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用 大鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒 Rat mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit
N-羥基丁二(>98%,BR) N-Hydroxysuccinimide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒10/50
沒食子酸一水物(標(biāo)準(zhǔn)品) Gallic acid monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 動物細(xì)胞/組織亮氨酸氨基肽酶(leucineaminopeptidase;LAP)電泳分析試劑盒5
沒食子酸一水物 Gallic acid monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR 動物細(xì)胞/組織莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5
1-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR) a-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動物細(xì)胞/組織葡萄糖0酸變位酶(phosphoglucomase;PGM)電泳分析試劑盒5
氫氧化鈣(>95%,BR) Calcium hydroxide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 動物細(xì)胞/組織葡萄糖6-0酸異構(gòu)酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)電泳分析試劑盒5
低粘度羥丙基纖維素 HPC, hydroxypropyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:150~400 mpa.s,BR 動物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放比色法定量檢測試劑盒10
L(+)二鈉二水(>98%,BC ) L(+) tartrate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 動物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒(含抗體)10
鹽酸吡哆胺(>98%,BC ) Pyridoxamine, dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 動物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10
水楊酸鈉(>99%,USP) salicylate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 動物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10
3-(環(huán)己氨基 )-1-丙磺酸鈉(分子生物學(xué)級) CAPS, salt 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級 動物細(xì)胞/組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50