產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3266 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
馬隱秘桿菌PCR檢測試劑盒說明書 | Arcanobacterium equiPCR | BKP3266 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:馬隱秘桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Tenacigenin B 中文名: 分子式:C21H32O5 度:% 兔內(nèi)啡肽-b(rabbit Endorphin-b) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Uzarigenin 中文名: 分子式:C23H34O4 度:97.5% 兔雌二醇(rabbi E2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Odoroside H 中文名: 分子式:C30H46O8 度:98.5% 兔上腺素(rabbit EPI) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Neridienone B 中文名: 分子式:C21H28O4 度:95.0% 兔內(nèi)皮型合成酶elisa試劑盒 兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒、兔內(nèi)皮型合成酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Neritaloside 中文名: 分子式:C32H48O10 度:97.5% 兔基質(zhì)金屬蛋白酶1elisa試劑盒 兔基質(zhì)金屬蛋白酶1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔基質(zhì)金屬蛋白酶1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔基質(zhì)金屬蛋白酶1試劑盒、兔基質(zhì)金屬蛋白酶1elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Cerebroside B 88642-46-0 中文名:腦苷酯B 分子式:C41H77NO9 兔子素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Oxododecanedioic acid 30828-09-2 中文名: 分子式:C12H20O5 Human adenovirus IgG (ADV-IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒
Rengynic acid 517883-38-4 中文名: 分子式:C8H14O4 HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Epirengynic acid 1310146-00-9 中文名: 分子式:C8H14O4 HumanDihydrotestosterone,DHTELISA試劑盒人雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 81053-14-7 中文名: 分子式:C9H14O4 組織NADPH細(xì)胞色素C還原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
馬隱秘桿菌PCR檢測試劑盒說明書結(jié)晶玫瑰(>98%,BR) α-(Trichloromethyl)benzyl acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA檢測試劑盒Humangasin-reliasingpeptide,GRPELISAKit 96T/48T
三甲基乙酸(>99%,BR) Trimethylacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠素F2α(PGF2α)試劑盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit
轉(zhuǎn)染試劑(溶液) Transfection Reagents-Biofection 質(zhì)量規(guī)格:>95%,分子生物學(xué)級(jí) 英文名稱Rattarate-resistaacidphosphataseorm5bELISAKit大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP5b)規(guī)格:96T/48T
反式肉桂醛(>95%,BR) trans-Cinnamaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 簡單細(xì)菌結(jié)晶紫染色試劑盒50
富勒烯 C60(),巴克球 C60 Fullerene C60 (pure) 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(HPLC) ELISAKitVDR人維生素D受體規(guī)格:48T/96T
富勒烯提取物,C60(含約20%的C70),巴克球提取物 ullerene Extract, C60 (contains ca. 20% C70) 質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(HPLC) 小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA 試劑盒
富勒烯 C60,巴克球 C60 Fullerene C60 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC) Rat endostatin (ES) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒
富勒烯 C70,巴克球 C70 Fullerene C70 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) HumanactivatedcoagulationfactorⅫ,FⅫaELISAKit 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
C60MC12 C60MC12 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC) Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISA試劑盒人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
單壁碳納米管(>55%) 小于2nm(直徑),5-15μm(長度) Carbon Nanotube Single-walled (>55%) below 2nm(diam.), 5-15μm(length) 質(zhì)量規(guī)格: 植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量檢測試劑盒20
E-64d,蛋白酶抑制劑,阿洛司他丁 E64d,E-64d 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人(DF)抗體(IgG)試劑盒 Human DF IgG ELISA kit
2’-脫氧胞苷-5‘-二鈉鹽 dCMP,2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人抗體(DF-Ab)試劑盒 Human dengue fever aibody,DF-Ab ELISA Kit
dAMP;2’-脫氧腺苷-5‘-單 2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人抗體IgM(DF-Ab IgM)試劑盒 Human dengue fever aibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kit
黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽 FAD-Na2 質(zhì)量規(guī)格:BR,羅氏進(jìn)分 人低分子量細(xì)胞角蛋白(CK-LMW)ELISA檢測試劑盒HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 96T/48T
GTP;鳥苷-5‘-三鈉鹽 GTP, 3 Salt 質(zhì)量規(guī)格:>90%,分子生物學(xué)級(jí) 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)ELISA檢測試劑盒Humanlowmolecular-weightprotein/proteasomebeta-typesubunit,LMP7/PSMB9ELISAKit 96T/48T
肌苷-5’-二鈉鹽 5-IMP,2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)試劑盒 Human LMP7/PSMB9 ELISA Kit
尿苷-5’-二鈉鹽(UDP) Uridine 5'-diphosphate salt from 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人(LDL)ELISA檢測試劑盒Humanlowdensitylipoprotein,LDLELISAKit 96T/48T
5’-尿苷酸二鈉(UMP) 5'-UMP-Na2 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人(LDL)試劑盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISA Kit
dAMP-Na2;脫氧腺苷二鈉 2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Di salt(dAMP-Na2) 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR 人復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒 Human LDL-IC ELISA Kit
ATP.Na2; 腺苷-5’-三二鈉鹽水合物 5'-ATP-Na2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng),三水合物 人受體(LDLR)ELISA檢測試劑盒Humanlowdensitylipoproteieceptor,LDLRELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。