產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3263 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
變形絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Aphanomyces astaciPCR | BKP3263 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:變形絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Tegafur 17902-23-7 中文名:替加氟 分子式:C8H9FN2O3 人真核翻譯起始因子3aelisa試劑盒 人真核翻譯起始因子3a試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人真核翻譯起始因子3a試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人真核翻譯起始因子3a試劑盒、人真核翻譯起始因子3a elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Sorafenib tosylate 475207-59-1 中文名:索拉非尼 分子式:C28H24ClF3N4O6S 人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素elisa試劑盒 人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒、人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Sorafenib 284461-73-0 中文名:索拉非尼 分子式:C21H16ClF3N4O3 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Loxoprofen 68767-14-6 中文名:洛索洛芬 分子式:C15H18O3 人早老素2elisa試劑盒 人早老素2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人早老素2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人早老素2試劑盒、人早老素2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Retigabine 150812-12-7 中文名:瑞替加濱 分子式:C16H18FN3O2 人著絲粒蛋白Belisa試劑盒 人著絲粒蛋白B試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人著絲粒蛋白B試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人著絲粒蛋白B試劑盒、人著絲粒蛋白B elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Allitol 488-44-8 中文名:蒜糖醇 分子式:C6H14O6 HumanDiphtheriaaibodyELISA試劑盒人白喉抗體(DiphtheriaAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol 154801-30-6 中文名: 分子式:C42H85NO5 組織NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20/50次(10樣本)
3-Methoxyfuran 3420-57-3 中文名: 分子式:C5H6O2 Humanphosphoglyceratemase2,PGAM2ELISAKit人0酸甘油酸變位酶2(PGAM2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Soyacerebroside I 114297-20-0 中文名: 分子式:C40H75NO9 兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
D-Pinitol 10284-63-6 中文名:D-松醇 分子式:C7H14O6 Human adenovirus aigen (ADV-Ag) ELISA Kit 人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒
變形絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)3',5'-二羥基苯乙酮(>98.0%(GC)) 3',5'-Dihydroxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 96T/48T
3',5'-芐氧基苯乙酮(>97.0%(GC)) 3',5'-Dibenzyloxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)試劑盒 Human Ierleukin 1β conveing enzyme,ICE ELISA Kit
3,5-二甲氧基芐醇(>98.0%(GC)) 3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱MouseLBPELISAKit小鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)規(guī)格:96T/48T
3,5-二甲氧基芐(>96.0%(GC)) 3,5-Dimethoxybenzyl Bromide 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) PH2-3顯色(CRESOLRED)指示溶液50毫升
3,5-二-1-三甲基硅基苯(>97.0%(GC)) 3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3',5'-二-4'-羥基苯乙酮(>97.0%(GC)) 3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 ,英文名: CA ELISA Kit
3,5-二羥基苯甲酰胺(>98.0%(HPLC)(N)) 3,5-Dihydroxybenzamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N) 大鼠己糖激酶(HK)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHexokinase,HKELISAKit 96T/48T
3,5-二芐氧基(>98.0%(GC)) 3,5-Dibenzyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人白介素-1β前體(Pro-IL-1β)試劑盒 Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA Kit
六 Hexaphenylbenzene 質(zhì)量規(guī)格: 92.40-97.20 %(碳元素分析) 英文名稱MouseLPSELISAKit小鼠脂多糖(LPS)規(guī)格:96T/48T
1,3,5-三(4-羧基苯基)苯(>98.0%(HPLC)) 1,3,5-Tris(4-carboxyphenyl)benzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) PH3-4顯色(METHYLORANGE)指示溶液50毫升
D-山梨醇 D-Sorbitol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子13(FGF-13)試劑盒 Human FGF-13 ELISA Kit
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP) N-Octyl-β-D-glucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:>98%,用于蛋白分析 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)試劑盒 Human FGF21 ELISA kit
L-核糖 L-(+)-Ribose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF-23)試劑盒 Human fibroblast growth factor-23,FGF-23 ELISA Kit
L-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品) L-(+)-Ribose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)試劑盒 Human FGF4 ELISA kit
2-脫氧-L-核糖 2-Deoxy-L-ribose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(FGF6)試劑盒 Human FGF6 ELISA kit
4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷 4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews 質(zhì)量規(guī)格:0.99 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8(FGF8)試劑盒 Human FGF8 ELISA Kit
2-脫氧-D-核糖 2-Deoxy-D-Ribose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(FGF9)試劑盒 Human FGF9 ELISA kit
D-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Galactose 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人程序性死亡-1(PD-1)試劑盒 Human PD-1 ELISA Kit
D-半乳糖 D-Galactose 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)試劑盒 Human PD-L1 ELISA Kit
鹽酸肼;雙鹽酸肼 Hydrazine dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人程序性細(xì)胞死亡因子4(PDCD4)試劑盒 Human PDCD4 ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。