產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3254 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鵝裂口線蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Amidostomum anseriPCR | BKP3254 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:鵝裂口線蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Sulfamonomethoxine 38006-08-5 中文名:磺胺間甲氧嘧啶鈉 分子式:C11H11N4NaO3S 度:98.0% 小鼠溶菌酶(LZM)ELISAKit
Sulfamonomethoxine 1220-83-3 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S 度:98.0% 小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒
Sulfamethoxazole 723-46-6 中文名:磺胺甲噁唑 分子式:C10H11N3O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
Sulfamethazine 57-68-1 中文名:磺胺二甲嘧啶 分子式:C12H14N4O2S 度:99.0% 小鼠樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
Sulfaguanidine 57-67-0 中文名:磺胺脒 分子式:C7H10N4O2S 度:99.0% 小鼠樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
4-Hydroxysapriparaquinone 120278-25-3 中文名: 分子式:C20H26O4 兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Phyllostine 27270-89-9 中文名: 分子式:C7H6O4 Rat thrombospondin / thrombin sensitive protein 1 (TSP-1) ELISA Kit 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒
2-Methoxystypandrone 85122-21-0 中文名: 分子式:C14H12O5 Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 人球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Lapachol 84-79-7 中文名:拉帕醇 分子式: HumandysophinELISA試劑盒人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Deoxylapachol 3568-90-9 中文名: 分子式:C15H14O2 組織P38β2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
鵝裂口線蟲PCR檢測試劑盒說明書三亞苯(>96.0%(GC)) Triphenylene 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)ELISA檢測試劑盒Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISAKit 96T/48T
內(nèi)消旋-四苯基卟吩(>92.0%(HPLC)) meso-Tetraphenylchlorin 質(zhì)量規(guī)格:>92.0%(HPLC) 大鼠前白蛋白(PA)試劑盒 Rat prealbumin,PA ELISA Kit
四苯基卟吩(不含氯)(>98.0%(HPLC)) Tetraphenylporphyrin (Chlorin free) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 英文名稱RatargininevasopressinELISAKIT大鼠精氨酸加壓素規(guī)格:96T/48T
2,4,6-三苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2,4,6-Triphenyl-1,3,5-triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 酵母DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20
1,3-二苯基-1,3-丙二酮(>98.0%(GC)) 1,3-Diphenyl-1,3-propanedione 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) ELISAKitMAP-2人微管相關(guān)蛋白2規(guī)格:48T/96T
2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC)) 2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 小鼠多巴胺受體D3(DRD3)ELISA試劑盒 ,英文名: DRD3 ELISA Kit
9H,9H-三十氟-8,10-十七烷二酮(>98.0%(GC)) 9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedione 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA檢測試劑盒Humanheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 96T/48T
9-菲(>98.0%(GC)) 9-Bromophenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GL4)試劑盒 Rat glucose anspoer 4,GL4 ELISA Kit
3-菲(>98.0%(GC)) 3-Bromophenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱RatHaptoglobinELISAKIT大鼠結(jié)合珠蛋白(Hpt)規(guī)格:96T/48T
3,6-二甲基菲(>95.0%(GC)) 3,6-Dimethylphenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 酵母F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
D-半胱氨酸鹽酸鹽一水 D-Cysteine hydrochloride monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR,一水物 人谷胱甘肽(GSH)試劑盒 Human glathione,GSH ELISA Kit
鈣蛋白酶抑制劑II(進(jìn)口) Calpain Inhibitor II(ALLM) 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進(jìn)口 人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA檢測試劑盒HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 96T/48T
炔孕酮/素(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethisterone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶TT(GSTπ)試劑盒 Human Glathione S-ansferase TT,GSTπ ELISA Kit
炔孕酮/素 Ethisterone 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒 Human GSH-Px ELISA Kit
D-胱氨酸 D-Cystine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人谷胱甘肽還原酶(GR)試劑盒 Human Glathione Reductase,GR ELISA Kit
DL-色氨酸 DL-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA檢測試劑盒HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISAKit 96T/48T
DL-絲氨酸 DL-Serine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)試劑盒 Human glathione S-ansferases,GSTpi ELISA Kit
L-蛋氨酸;甲硫氨酸 L-Mine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人骨保護(hù)素(OPG)試劑盒 Human Osteoprotegerin,OPG ELISA KIT
DL-苯丙氨酸 DL-Phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR 人骨成型蛋白15(BMP-15/GDF-9B)試劑盒 Human BMP-15 ELISA kit
DL-天冬酰胺,一水 DL-Asparagine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99% 人骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 Human BMP-2 ELISA kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。