|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3251 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
奧爾帕瓦約病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Allpaahuayo virus(ALLV)RTPCR | BKP3251 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：奧爾帕瓦約病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
Sulfaguanidine 中文名：磺胺脒 分子式：C7H10N4O2S 脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白 (FABP4) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Sulfadiazine 中文名：磺胺嘧啶 分子式：C10H10N4O2S 凋亡相關(guān)因子 (Fas/Apo-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Sulfaclozine 中文名：磺胺氯吡嗪 分子式：C10H9ClN4O2S 凋亡相關(guān)因子配體 (Fas-L) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Sucrose 中文名： 分子式：C12H22O11 胎球蛋白 -A(Fetuin-A) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Succinic acid 中文名： 分子式：C4H6O4 脂褐質(zhì)測(cè)試盒 Lipfuscin test box
Dihydrotanshinone I 87205-99-0 中文名： 分子式：C18H14O3 Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISA試劑盒人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Tanshinone IIB 17397-93-2 中文名：丹參酮IIB 分子式：C19H18O4 組織N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Tanshinone I 568-73-0 中文名： 分子式：C18H12O3 humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Neoprzewaquinone A 630057-39-5 中文名： 分子式：C36H28O6 兔子球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Cryptotanshinone 35825-57-1 中文名：隱丹參酮 分子式：C19H20O3 People leils binding type AFP / AFP Varia 3 (AFP-L3) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒E
奧爾帕瓦約病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)2,5-雙(4-氨苯基)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC)) 2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHomocysteicacid,HcyELISAKit 96T/48T
2-(2-羥苯基)苯并惡唑(>98.0%(GC)(T)) 2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 人白介素19(IL-19)試劑盒 Human IL-19 ELISA Kit
5,6-二-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC)) 5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱MousePCNAELISAKit小鼠增殖細(xì)胞抗原(PCNA)規(guī)格：96T/48T
2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T)) 2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) PH7-8顯色(PHENOLRED)指示溶液50毫升
1-氨基芘(>98.0%(HPLC)(T)) 1-Aminopyrene 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISA試劑盒豬內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1-芘(>94.0%(GC)) 1-Bromopyrene 質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(GC) 小鼠多巴胺(DA)ELISA 試劑盒
4-芘(>95.0%(GC)) 4-Bromopyrene 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) Rat visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒
1,6-二氨基芘(>98.0%(HPLC)(N)) 1,6-Diaminopyrene 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N) HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 人素A2(TX-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
1,3-二氨基芘 1,3-Diaminopyrene 質(zhì)量規(guī)格： HumanAquaporin3,AQP-3ELISA試劑盒人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2,7-二叔丁基芘(>98.0%(GC)) 2,7-Di-tert-butylpyrene 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 植物乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
DL-組氨酸 DL-Histidine 質(zhì)量規(guī)格：0.98 人胱抑素F(CST7)試劑盒 Human Cystatin-F,CST7 ELISA kit
DL-組氨酸鹽酸鹽 DL-Histidine·HCl 質(zhì)量規(guī)格：>98%,一水物，BR 人胱抑素SN(CST1)試劑盒 Human Cystatin-SN,CST1 ELISA kit
DL-高苯丙氨酸 DL-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 96T/48T
DL-高絲氨酸 DL-Homoserine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)試劑盒 Human pan-cytokeratin,P-CK ELISA Kit
克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸 Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl 質(zhì)量規(guī)格：>99%,MET抑制劑 人廣州管園線蟲抗體(IgG)試劑盒 Human ai-angiosongylus caonensis aibody IgG ELISA Kit
DL-賴氨酸鹽酸鹽 DL-Lysine·HCl 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人廣州管園線蟲抗體(IgM)試劑盒 Human ai-angiosongylus caonensis aibody IgM ELISA Kit
DL-正纈氨酸 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人果糖胺(FRA)試劑盒 Human fructosamin,FRA ELISA kit
DL-正纈氨酸 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格：0.99 人果糖二0酸縮酶A(ALDOA)試劑盒 Human ALDOA ELISA kit
DL-焦谷氨酸 DL-Pyroglutamic acid 質(zhì)量規(guī)格：0.98 人過(guò)氧化氫酶(CAT)試劑盒 Human Catalase,CAT ELISA kit
DL-叔亮氨酸 DL-tert-Leucine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人過(guò)氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)試劑盒 Human PPARGC1 ELISA Kit
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
