產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3248 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
糞產(chǎn)堿桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Alcaligenes faecalisPCR | BKP3248 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:糞產(chǎn)堿桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Strontium ranelate 中文名:雷尼酸鍶 分子式:C12H10N2O8S 脂蛋白(a)[LP(a)]測(cè)試盒 Lipoprotein (a) [LP (a)] test case
Stigmasterol glucoside 中文名: 分子式:C35H58O6 游離脂肪酸(NEFA)測(cè)試盒 Free fatty acid (NEFA) test case
Stigmasterol 中文名:豆甾醇 分子式:C29H48O 脂肪酶測(cè)試盒 Lipase test kit
Stigmastane-3β,5α,6β-triol 中文名:豆甾-3β,5α,6β-三醇 分子式:C29H52O3 脂聯(lián)素 英文名稱: Adiponectin 英文縮寫: APN/ADP 規(guī)格: 48T/96T
Stigmastane-3,6-dione 中文名:豆甾烷-3,6-二酮 分子式:C29H48O2 脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 英文名稱: Adipocyte Fatty Acid Binding Protein 英文縮寫: a FABP 規(guī)格: 48T/96T
Dehydroherbarin 36379-74-5 中文名: 分子式:C16H14O5 兔子球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Herbarin 36379-67-6 中文名: 分子式:C16H16O6 Human costimulatory molecular receptor (CMR) ELISA Kit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA試劑盒
Colelomycerone A 1191896-73-7 中文名: 分子式:C17H18O6 HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit 人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Herbaridine B 1151511-05-5 中文名: 分子式:C17H20O6 HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISA試劑盒人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Shiraiachrome A 124709-39-3 中文名: 分子式:C30H26O10 組織PAK4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
糞產(chǎn)堿桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格1-蒽(>97.0%(GC)) 1-Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 96T/48T
2-蒽(>97.0%(GC)) 2-Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 人白介素18結(jié)合蛋白(IL-18BP)試劑盒 Human IL-18BP ELISA Kit
9,10-雙(二乙基膦甲基)蒽(>98.0%(GC)) 9,10-Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱MouseapoB100ELISAKit小鼠載脂蛋白B100(apoB100)規(guī)格:96T/48T
9-蒽(>99.0%(GC)(HPLC)) 9-Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(HPLC) PH8-9顯色(THYMOLBLUE)指示溶液50毫升
2--9,10-二苯基蒽(>95.0%(GC)) 2-Bromo-9,10-diphenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA試劑盒豬內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9--10-苯基蒽(>98.0%(GC)) 9-Bromo-10-phenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)ELISA試劑盒 ,英文名: TEP1 ELISA Kit
2-氯蒽(>98.0%(GC)) 2-Chloroanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanhepatitisBvirusXieractingprotein,HBXIPELISAKit 96T/48T
9,10-二氯蒽(>96.0%(GC)) 9,10-Dichloroanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)試劑盒 Rat bovine serum albumin(BSA)aibody IgG ELISA kit
1,5-二蒽(>97.0%(GC)) 1,5-Dibromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 英文名稱RatcalcitoningenerelatedpeptideELISAKit大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,8-二蒽(>98.0%(GC)) 1,8-Diiodoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 酵母β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性生物發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20
DL-賴氨酸 DL-Lysine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人泛素分解酶(DUB)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit 96T/48T
DL-精氨酸鹽酸鹽 DL-Arginine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISAKit 96T/48T
左旋肉堿;維生素BT;左卡尼汀 L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人泛素激活酶(E1/UBAE)試劑盒 Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit
左卡尼汀;左旋肉堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Levocarnitine;L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測(cè)定 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISAKit 96T/48T
L-谷氨酸鈉,一水 L-Glutamic acid mono salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99% 人泛素結(jié)合酶E2D1(UBC4/ 5的同源物,酵母)(UBE2D1)試劑盒 Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D1,UBE2D1 ELISA kit
L-谷氨酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人泛素結(jié)合酶E2D2(UBC4/5的同源物,酵母)(UBE2D2)試劑盒 Human Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D2,UBE2D2 ELISA kit
谷胱甘肽(還原型) Glutathione (Reduced);GSH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISAKit 96T/48T
L-谷胱甘肽(標(biāo)準(zhǔn)品) Glutathione (Reduced) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型 人芳基硫酸酯酶A(ASA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanarylsulfataseA,ASAELISAKit 96T/48T
谷胱甘肽(氧化型) Glutathione(Oxidized) 質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR 人芳香烴受體(AhR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 96T/48T
DL-異亮氨酸 DL-Isoleucine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人芳香烴受體(AhR)試劑盒 Human AhR ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。