產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3214 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Acanthamoeba spp.PCR | BKP3214 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Senkyunolide C 91652-78-7 中文名:洋川芎內(nèi)酯C 分子式:C12H12O3 Humanplacealprotein,PPELISAKit人胎盤(pán)蛋白(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Docosanoic acid 112-85-6 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2 兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Pilosol A 501086-15-3 中文名: 分子式:C13H12O Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒
Glycerol 56-81-5 中文名:甘油 分子式:C3H8O3 HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Riligustilide 89354-45-0 中文名: 分子式:C24H28O4 Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Paris Saponin VII 68124-04-9 中文名:重樓皂苷VII 分子式:C51H82O21 Mouseai-thyroid-globulinaibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Polyphyllin D 50773-41-6 中文名:重樓皂苷D 分子式:C44H70O16 HumanEotaxin1ELISA試劑盒人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Sitostenone 1058-61-3 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 組織PKG-I激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 36450-02-9 中文名:6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人胰激肽原酶(PK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
22-Dehydroclerosteryl acetate 28594-00-5 中文名: 分子式:C31H48O2 兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)6'-(二乙氨基)-1',2'-苯并熒烷(>98.0%(GC)(T)) 6'-(Diethylamino)-1',2'-benzofluoran 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA試劑盒兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T)) 2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)ELISA試劑盒 ,英文名: PDIA4 ELISA Kit
3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC)) 3',6'-Dimethoxyfluoran 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 人冷球蛋白(CG)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCryoglobulin,CGELISAKit 96T/48T
1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC)) 1,1'-Methylenedi-2-naphthol 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)試劑盒 Rat Endothelial lipase,EL ELISA Kit
2-萘基芐基醚(>98.0%(GC)) Benzyl 2-Naphthyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱(chēng)RatMyoglobinELISAKit大鼠肌紅蛋白(MYO)規(guī)格:96T/48T
己酰胺(>98.0%(N)) Hexanamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N) 酵母菌SD-P/HIS培養(yǎng)基100毫升
碳酸二苯酯(>99.0%(GC)) Diphenyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) ELISAKitCA-2人酶2規(guī)格:48T/96T
二芐基亞砜(>98.0%(GC)) Dibenzyl Sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDIA2)ELISA試劑盒 ,英文名: PDIA2 ELISA Kit
乙二醇二苯醚(>99.0%(GC)) Ethylene Glycol Diphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISAKit 96T/48T
十六碳酰胺(>95.0%(GC)) Hexadecanamide 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 大鼠內(nèi)皮抑素(ES)試劑盒 Rat Endostatin,ES ELISA Kit
7-Deaza-7-I-2’-dA 7-Deaza-7-I-2’-dA 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分 小鼠兒茶酚抑素(CAT)ELISA試劑盒 ,英文名: CAT ELISA Kit
2',3'-雙脫氧腺苷(ddA) Dideoxyadenosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠二(MDA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemalondialchehyche,MDAELISAKit 96T/48T
木糖醇 Xylitol 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,AR 小鼠二(MDA)ELISA試劑盒 ,英文名: MDA ELISA Kit
木糖醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Xylitol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2',3'-二脫氧胸苷(ddT) 2',3'-Dideoxythymidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 小鼠二級(jí)組織趨化因子(SLC)ELISA試劑盒 ,英文名: SLC ELISA Kit
烯丙基-β-D-吡喃半乳糖苷 ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠二級(jí)組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 ,英文名: SLC/CCL21 ELISA Kit
2-氨基環(huán)乙醇 2-Aminocyclohexanol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,日本原裝進(jìn)口 小鼠二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)ELISA試劑盒 ,英文名: DLD ELISA Kit
Y-27632.2HCl Y27632 質(zhì)量規(guī)格:>98%,ROCK1(p160ROCK) 選擇性抑制劑 小鼠二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙?;?/span>(DLAT)ELISA試劑盒 ,英文名: DLAT ELISA Kit
靈芝酸A(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderic acid A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒 ,英文名: DPYD ELISA Kit
蝙蝠葛蘇林堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Daurisoline 質(zhì)量規(guī)格:≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)ELISA試劑盒 ,英文名: DHODH ELISA Kit
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:多食棘阿米巴屬通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。