產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3290 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雞喉病毒即禽病毒1型PCR檢測試劑盒說明書 | Avian Infectious Laryngotracheitis Virus(AILTV)(1)PCR | BKP3290 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:雞喉病毒即禽病毒1型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Tokinolide B 112966-16-2 中文名: 分子式:C24H28O4 組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性檢測試劑盒20次
Methyl 4-O-feruloylquinate 195723-10-5 中文名: 分子式:C18H22O9 HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit人胎盤堿性0酸酶(PLAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Trehalose 99-20-7 中文名:海藻糖 分子式:C12H22O11 兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Chlorogenic acid 327-97-9 中文名:綠原酸 分子式:C16H18O9 Human plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
Ethyl rutinoside 187539-57-7 中文名:蕓香糖乙苷 分子式:C14H26O10 HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 人可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
3,3-Dimethylacrylic acid 541-47-9 中文名:千里光酸 分子式:C5H8O2 兔子緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Campsiketalin 93675-96-8 中文名: 分子式:C10H20O4 Rat von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 大鼠性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒
Macranthoin G 159934-13-1 中文名:灰氈毛忍冬素G 分子式:C26H26O12 Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 人β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
5-O-Ethylcleroindicin D 488138-32-5 中文名: 分子式:C10H16O4 HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒人脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-Hydroxymethyl-2-furoic acid 6338-41-6 中文名:5-羥甲基-2-糠酸 分子式:C6H6O4 組織ITK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
雞喉病毒即禽病毒1型PCR檢測試劑盒說明書生長激素釋放因子-2 GHRP-2 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA檢測試劑盒Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 96T/48T
胰素樣肽-2(1-34),人 GLP-2 (1-34) (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISA Kit
胰素(1-29),牛,人,豬 Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱RatFollistatinELISAKit大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰素(19-29),牛,人,豬 Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 基質(zhì)膠體法人體胚胎干細胞繁殖試劑盒10
胰素樣肽Ⅰ(7-36)酰胺,人 Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitCTX人細胞規(guī)格:48T/96T
激素釋放激素相關(guān)蛋白(1-13),人 Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 ,英文名: PARC/CCL18 ELISA Kit
海沙瑞林 Hexarelin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA檢測試劑盒Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T
組胺素5 Histatin 5 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人白介素23(IL-23)試劑盒 Human Ierleukin 23,IL-23 ELISA Kit
惡性因子(1-34)酰胺,人 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱MousetotalhemolyticcomplemeELISAKit小鼠總?cè)苎a體(CH50)規(guī)格:96T/48T
惡性因子(1-34), 人 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PDGF-A蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
L鼠李糖 HPLC≥98% 100mg MouseHexokinase,HKELISA試劑盒小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L絲氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L蘇氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA試劑盒小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L天冬氨酸 HPLC≥99% 200mg MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L天冬酰胺 HPLC≥98% 200mg MouseHistamine,HISELISAKit小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L纈氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHistamine,HISELISA試劑盒小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L異亮氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHistoneDeacetylase,HDELISAKit小鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L組氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒小鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L組氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg Mousehiston-H2bELISAKit小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Milataxel HPLC≥98% 20mg Mousehiston-H2bELISA試劑盒小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。